α-L-巖藻糖苷酶（AFU）是一種由人類(lèi)FUCA1基因編碼的酶，能夠催化L-巖藻糖的分解。這種酶的遺傳性缺乏會(huì)導(dǎo)致一種神經(jīng)黏脂沉積癥——巖藻糖苷病，其特征是巖藻糖的積累。巖藻糖苷酶血清活性低下還與卵巢癌有關(guān)。在糖尿病、甲狀腺功能亢進(jìn)、肝硬化和肝炎患者中觀察到巖藻糖苷酶血清活性升高。此外，其活性增加還與肺癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、子宮癌和肝癌有關(guān)。

BioAssay Systems的非放射性、比色法AFU檢測(cè)基于從合成底物中水解4-硝基苯酚。加入終止試劑后，硝基苯酚會(huì)呈現(xiàn)強(qiáng)顏色反應(yīng)。加入終止試劑后在405 nm處的吸光度增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷(xiāo)產(chǎn)品α-l-巖藻糖苷酶測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)：

- 高靈敏度和寬線(xiàn)性范圍。線(xiàn)性檢測(cè)范圍（10 uL樣本）：20分鐘反應(yīng)時(shí)間為1 - 100 U/L。

- 均相且簡(jiǎn)單的操作流程。簡(jiǎn)單的加樣-混合-讀取流程可在20分鐘內(nèi)可靠定量巖藻糖苷酶活性。

- 穩(wěn)健且適合高通量篩選。所有試劑均適用于高通量液體處理儀器，可輕松自動(dòng)化，每天測(cè)量數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用：

- 生物樣本（如血漿、血清、組織、細(xì)胞裂解液等）中α-L-巖藻糖苷酶活性的測(cè)定。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測(cè)）：

- 底物緩沖液：10 mL

- 終止試劑：12 mL

- 標(biāo)準(zhǔn)品：1 mL（12.5 mM硝基苯酚）

儲(chǔ)存條件：  

試劑盒在室溫下運(yùn)輸。收到后將所有組分儲(chǔ)存于-20°C。有效期：收到后6個(gè)月。

注意事項(xiàng)：  

試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)注意事項(xiàng)。請(qǐng)參考材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

操作步驟：

該檢測(cè)基于動(dòng)力學(xué)反應(yīng)。為確保孵育時(shí)間一致，加入底物和終止試劑到樣本中的操作應(yīng)迅速，混合應(yīng)簡(jiǎn)短但充分。建議使用多通道移液器。

樣本準(zhǔn)備：

- 血清和血漿可以直接檢測(cè)。

- 組織：在解剖前，用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。將組織（50 mg）在含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）的緩沖液中勻漿。在4°C下以10,000 × g離心15分鐘。取上清液用于檢測(cè)。

- 細(xì)胞裂解液：通過(guò)在4°C下以2,000 × g離心5分鐘收集細(xì)胞。對(duì)于貼壁細(xì)胞，不要使用蛋白酶酶收獲細(xì)胞，而是使用橡膠刮刀。在含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）的冷緩沖液中適當(dāng)體積內(nèi)勻漿或超聲細(xì)胞。在4°C下以10,000 × g離心15分鐘。取上清液用于檢測(cè)。

- 所有樣本可以在-80至-20°C下儲(chǔ)存至少一個(gè)月。

試劑準(zhǔn)備：  

將底物緩沖液平衡至所需的反應(yīng)溫度（例如25°C或37°C）。

標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：  

將10 uL 12.5 mM硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)品與490 uL去離子水混合，制備250 uM標(biāo)準(zhǔn)品。

反應(yīng)準(zhǔn)備：

1. 將每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品（ODSTD）的100 uL分別加入透明平底96孔板的孔中。

2. 將每個(gè)樣本的20 uL分別加入單獨(dú)的孔中。向每個(gè)樣本孔中加入80 uL底物。輕拍板子以混合。

3. 在25°C或所需溫度下孵育20分鐘。向每個(gè)孔中加入100 uL終止試劑。輕拍板子以混合。

4. 讀取405 nm的吸光度。

注意：如果樣本有顏色或不透明，則需要樣本空白（ODBLANK）。向一個(gè)孔中加入20 uL樣本，并加入80 uL去離子水。孵育后加入100 uL終止試劑。

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：

文獻(xiàn)：

1. Giardina M.G. et al. (1992) Serum alpha-L-fucosidase. A useful marker in the diagnosis of hepatocellular carcinoma. Cancer. 70:1044-1048

2. Fernandez-Rodriguez AD. Et al. (2000) Value of the serum alpha-Lfucosidase activity in the diagnosis of colorectal cancer. Oncology 59(4): 310-316.

3. Alhadeff JA et al. (1975) Human liver alpha-L-fucosidase. Purification,characterization, and immunochemical studies. Journal Biol. Chem.250: 7106-7113.

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專(zhuān)注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類(lèi)齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)，以滿(mǎn)足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶(hù)提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。