異硫氰酸熒光素是生化試劑,也是醫(yī)學診斷藥物,主要用于熒光抗體技術(shù)中的熒光染料,能和各種抗體蛋白結(jié)合,結(jié)合后的抗體不喪失與一定抗原結(jié)合的特異性,并在堿性溶液中具有強烈的綠色熒光。用于醫(yī)學,農(nóng)學和畜牧等方面,可對由地細菌病毒和寄生蟲等所致疾病進行快速診斷。

FITC，英文全稱Fluorescein Isothiocyanate，中文名稱異硫氰酸熒光素，具有高吸收率、優(yōu)良的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性等特點，是生物學中應(yīng)用非常廣泛的一種綠色熒光素衍生物，其異硫氰酸基團可與蛋白的氨基末端或者伯胺反應(yīng)從而實現(xiàn)包括抗體，凝集素在內(nèi)的蛋白標記。除了用作蛋白質(zhì)標記物，還可用作蛋白質(zhì)熒光示蹤劑，標記抗體用以快速鑒定病原體，以及用于蛋白質(zhì)和多肽（HPLC）的微量測序。FITC為黃-橙色粉末，最大激發(fā)波長為494 nm。一旦激發(fā)，在最大發(fā)射波長520 nm處呈黃-綠色熒光。

FITC有兩種異構(gòu)體，異構(gòu)體I（Isomer I）和異構(gòu)體II（Isomer II）,二者在光譜性質(zhì)上基本沒有差異（無論是波長還是光強度），但是前者更易純化，所以相對便宜，應(yīng)用也較為廣泛。對于大部分應(yīng)用，混合型的FITC已能很好的滿足實驗要求。本品純度：≥95%，適合用于蛋白質(zhì)標記。

艾美捷異硫氰酸熒光素：

Cat #: B-CHM100

規(guī)格：100 mg

儲存：儲存溫度為-20°C，避光保存。

配方：C₂₁H₁₁NO₅S

兆瓦：389.38

純度：≥95%（HPLC）

光譜特性：Ex/Em=490/525 nm

外觀：黃色粉末

運輸和儲存：

儲存條件：儲存溫度為20°C，避光。

穩(wěn)定性：在適當?shù)膬Υ鏃l件下穩(wěn)定至少12個月。

異硫氰酸熒光素標記的抗體方案：

1、將待交聯(lián)的蛋白質(zhì)（濃度：1mg/mL）在交聯(lián)反應(yīng)緩沖液中在4°C下透析三次，將pH調(diào)節(jié)至9.0。交聯(lián)緩沖液的制備：溶解7.56 g NaHCO3，1.06 g Na?CO3和7.36g NaCl在水中的溶液稀釋至1L的最終體積。

2、將FITC以1 mg/mL的濃度溶解在二甲基亞砜中。為每次交聯(lián)反應(yīng)準備新鮮的FITC溶液，并避免暴露在光下。

3、將FITC緩慢添加到抗體溶液中，比例為P：F（蛋白質(zhì)：FITC）=1 mg：150μg。輕輕混合溶液，同時加入FITC，以確保與抗體均勻混合。讓反應(yīng)在黑暗中在4℃下進行8小時。

4、添加5 mol/L NH?Cl最終濃度為50 mmol/L，在4°C下停止反應(yīng)2小時。

5、將綴合物相對于PBS溶液透析至少四次，直到透析液變得清澈為止。

6、交聯(lián)材料的特性：

蛋白質(zhì)濃度（mg/mL）=[A280-0.31×A?gs]/1.4

F/P比：3.1×A?gs/[A280-0.31×A?gs]。該值應(yīng)介于2.5～6.5之間。

7、將FITC蛋白偶聯(lián)物儲存在pH 7.4的PBS中，補充0.1%的NaN3和1%的BSA，在4°C的黑暗中儲存。

Biogradetech是生命科學和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)關(guān)鍵原料與試劑的領(lǐng)先供應(yīng)商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質(zhì)組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經(jīng)科學、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。