DPP4抑制劑篩選試劑盒，基于熒光法，助力糖尿病治療研究

DPP（IV）抑制劑已成為一類新的口服抗糖尿病藥物。這些抑制劑通過抑制DPP對葡萄糖依賴性促胰島素多肽（GIP）和胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）的降解來促進葡萄糖穩態（IV）。GLP-1延長胰島素的作用，同時抑制胰高血糖素的釋放。

Biogradetech的DPP4抑制劑篩選試劑盒（BGT-KAT-100）提供了一種方便的基于熒光的方法，用于以96孔形式篩選DPP（Ⅳ）抑制劑。

艾美捷Biogradetech-DPP4抑制劑篩選試劑盒提供了一種方便的基于熒光的方法來篩選DPP（Ⅳ）抑制劑。該測定使用熒光底物Gly-Pro氨基甲基香豆素（AMC）來測量DPP（IV）的活性。DPP對肽鍵的切割釋放出游離的AMC基團，產生的熒光可以使用350-360nm的激發波長和450-465nm的發射波長進行分析。

DPP4抑制劑篩選試劑盒樣本數據：

此處顯示的數據是該試劑盒通常產生的數據示例；但是，您的結果將與這些結果不完全相同。不要使用以下數據直接與您的樣本進行比較。你的結果可能會有很大的不同。

西格列汀對DPP（IV）的抑制作用。“Veh.”表示100%的初始活動。基質濃度-100μM。IC50=14.4 nM

試劑準備：

1. DPP檢測緩沖液（10X）

此小瓶含有5毫升10倍濃縮的緩沖液。將3毫升檢測緩沖液濃縮液與27毫升HPLC級水混合稀釋。最終得到的緩沖液（最終濃度為20 mM Tris-HCl, pH 8.0, 含有100 mM NaCl和1 mM EDTA）應用于檢測以及稀釋試劑。在-20°C儲存時，稀釋后的緩沖液至少穩定六個月。

2. DPP（IV）（人類重組）

每個小瓶含有120微升人類重組DPP（IV）。在冰上解凍酶，向小瓶中加入480微升稀釋后的檢測緩沖液，并輕輕混合。稀釋后的酶在冰上穩定兩小時。一個小瓶的酶足以檢測60個孔。如果檢測整個板，請使用額外的小瓶。

3. DPP底物

此小瓶含有300微升5 mM的H-Gly-Pro與氨基甲基香豆素（AMC）偶聯。將120微升與2.88毫升稀釋后的檢測緩沖液混合并渦旋混合。這將足夠60個孔的底物溶液。根據需要準備額外的底物。底物溶液在室溫下穩定六小時。向檢測中添加50微升，最終濃度為100 ?M底物。注意：肽的Km值為17.4 ?M。根據用戶的判斷，特別是在檢測競爭性抑制劑（包括西他列汀陽性對照抑制劑）時，可以通過用檢測緩沖液稀釋來降低檢測中的底物濃度。

4. 西他列汀陽性對照抑制劑

此小瓶含有500納摩爾的抑制劑。用500微升稀釋后的檢測緩沖液重新懸浮以制備1 mM的庫存溶液。向檢測中添加10微升，孔中最終濃度為100 μM抑制劑。

DPP4抑制劑篩選試劑盒文獻參考：

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