人類CENP-E（KIF10）的保守運動域在原核系統(tǒng)中表達(dá)。重組蛋白在氨基末端含有GST標(biāo)簽，組合分子量為71 kDa。該蛋白在微管激活的ATP酶活性測試中已被確定為具有生物活性。蛋白質(zhì)以白色凍干粉末形式提供。

艾美捷CENP-E運動結(jié)構(gòu)域蛋白（重組人）的用途：

微管活化ATP酶活性的測定

鑒定/表征影響運動ATP酶活性的蛋白質(zhì)或小分子

鑒定/表征影響驅(qū)動蛋白運動性的蛋白質(zhì)或小分子

鑒定/表征影響運動/微管相互作用的蛋白質(zhì)或小分子

蛋白質(zhì)純度：

是通過在12%聚丙烯酰胺凝膠上掃描考馬斯藍(lán)染色蛋白質(zhì)的密度測定法確定的。所有驅(qū)動蛋白運動域的純度均為>85%。有關(guān)純度示例，請參見圖1。

生物活性 - 微管活化的 ATP酶測定通過使用：

驅(qū)動蛋白ELIPA測定試劑盒（貨號#BK060）監(jiān)測實時游離磷酸鹽的生成來測量CENP-E ATP酶活性。該測定基于330-氨基-360-巰基-2甲基嘌呤核糖核苷（MESG）在無機(jī)磷酸鹽（Pi）存在下催化轉(zhuǎn)化為6-氨基-7-巰基-2-甲基嘌呤時發(fā)生的吸光度偏移（6 nm - 7 nm）。一個Pi分子將在基本上不可逆的反應(yīng)中產(chǎn)生一個分子的2氨基-6-巰基-7-甲基嘌呤。因此，360nm處的吸光度與驅(qū)動蛋白ATP酶反應(yīng)中產(chǎn)生的Pi量成正比。在下面概述的條件下，CENP-E 微管激活的 ATP 酶活性的 Vmax 為每毫克 CP900 每分鐘產(chǎn)生的 >01 nmoles ATP（圖 2）。使用10分鐘終點測定（驅(qū)動蛋白ATP酶終點測定試劑盒，貨#BK053）的ATP酶速率為每毫克CP900每分鐘>01 nmoles ATP（數(shù)據(jù)未顯示）。

圖1：驅(qū)動蛋白運動域蛋白的純度。BimC（BM01），CENP-E（CP01）和Eg5（EG01）在SDS-PAGE凝膠上運行，并用考馬斯藍(lán)染色。

圖2：使用驅(qū)動蛋白ELIPA檢測試劑盒（貨號#BK060）的CENP-E微管激活A(yù)TP酶活性

Cytoskeleton公司成立于1993年，專注于生物化學(xué)和細(xì)胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾（PTM）、細(xì)胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品，尤其以細(xì)胞骨架相關(guān)研究見長，既能滿足于樣品較少的科學(xué)研究，也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務(wù)。