該測(cè)定允許鑒定將在體外與微管（MTs）結(jié)合的蛋白質(zhì)。該測(cè)定依賴于這樣一個(gè)事實(shí)，即MT在以100,000 x g 離心時(shí)會(huì)沉淀。因此，與MT相關(guān)的任何蛋白質(zhì)都會(huì)在離心過程中沉淀。對(duì)上清液與沉淀級(jí)分進(jìn)行簡(jiǎn)單的SDS-PAGE分析將確定蛋白質(zhì)是否能夠與MTs相關(guān)聯(lián)。本手冊(cè)中給出的測(cè)定描述適用于重組表達(dá)的“測(cè)試”蛋白，但是，該測(cè)定可以適用于細(xì)胞裂解物或體外翻譯產(chǎn)物。

應(yīng)該注意的是，應(yīng)獲得MT關(guān)聯(lián)的體內(nèi)確認(rèn)，以確認(rèn)該蛋白質(zhì)可以歸類為MAP。這種關(guān)聯(lián)不需要在整個(gè)細(xì)胞周期中發(fā)生，甚至可以在發(fā)育上受到調(diào)節(jié)，事實(shí)上，MAP與微管的短暫關(guān)聯(lián)是常態(tài)而不是例外。

艾美捷微管結(jié)合蛋白 Spin Down 檢測(cè)試劑盒 #BK029用途：

確定蛋白質(zhì)或化合物是否與微管結(jié)合。

測(cè)試各種缺失突變體仍然結(jié)合微管的能力，然后計(jì)算它們對(duì)微管的親和力，從而鑒定微管結(jié)合位點(diǎn)。

在ATP（驅(qū)動(dòng)蛋白）或GTP（動(dòng)力蛋白）的不可水解類似物存在下，從細(xì)胞中提取這些或在突變時(shí)顯示其結(jié)合親和力。

微管結(jié)合蛋白 Spin Down 檢測(cè)試劑盒內(nèi)容：

該試劑盒包含足夠的材料，可根據(jù)檢測(cè)量進(jìn)行 30-100 次檢測(cè)。包括以下試劑：

微管蛋白， >99% 純度， （# T240）

微管相關(guān)蛋白級(jí)分（陽性對(duì)照）（# MAPF）

牛血清白蛋白（BSA）蛋白（陰性對(duì)照）

一般微管蛋白緩沖液（# BST01）

微管蛋白甘油緩沖液（# BST05）

GTP （# BST06）

微管重懸緩沖液

紫杉醇（# TXD01）

二甲基亞胺

鹽提取緩沖液

包含詳細(xì)協(xié)議和廣泛故障排除指南的手冊(cè)

微管結(jié)合蛋白 Spin Down 檢測(cè)試劑盒示例結(jié)果：

通過將MT與微管相關(guān)蛋白級(jí)分（Cat.#MAPF）或BSA相結(jié)合來測(cè)試微管結(jié)合旋下測(cè)定。正如預(yù)期的那樣，MAPF與微管共沉積，而BSA則不（圖1）

圖：使用 BK029 的 MAP 旋速測(cè)定。將微管與緩沖液（MT），MAP蛋白（MT + MAPF）或BSA（MT + BSA）混合，并通過100,000×g離心沉淀MTs.通過SDS-PAGE檢查上清液（S）和沉淀（P）級(jí)分。MAP蛋白，但不是BSA，與MT結(jié)合并共沉淀。MAP（MAPF）或BSA（BSA）蛋白單獨(dú)不能沉淀。

Cytoskeleton公司成立于1993年，專注于生物化學(xué)和細(xì)胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發(fā)與生產(chǎn)。公司提供藥物篩選、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾（PTM）、細(xì)胞骨架研究相關(guān)的系列試劑盒和產(chǎn)品，尤其以細(xì)胞骨架相關(guān)研究見長(zhǎng)，既能滿足于樣品較少的科學(xué)研究，也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動(dòng)蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現(xiàn)有產(chǎn)品的藥物篩選服務(wù)。