轉(zhuǎn)鐵蛋白受體蛋白-1（TFRC）是一種細胞表面受體，它以高親和力結(jié)合血液中負載鐵的轉(zhuǎn)鐵蛋白，以促進鐵吸收到細胞中。因此，TFRC是人體鐵供應(yīng)鏈和總體穩(wěn)態(tài)的組成部分。細胞內(nèi)鐵水平、缺氧和CRE信號調(diào)節(jié)TFRC轉(zhuǎn)錄。此外，TFRC與多種形式癌癥的腫瘤進展階段相關(guān)。在細胞水平上，鐵過量會導(dǎo)致氧自由基形成和細胞功能障礙，而缺鐵會導(dǎo)致細胞快速死亡。因此，鐵水平失調(diào)與多種疾病狀態(tài)相關(guān)，包括帕金森病、肌萎縮側(cè)索硬化癥（ALS）、亨廷頓氏病、多發(fā)性硬化癥（MS）和腫瘤發(fā)生。

同樣重要的是TFRC的潛在治療用途。由于TFRC在腫瘤細胞表面上調(diào)，它已被靶向抑制成人T細胞白血病/淋巴瘤。此外，TFRC在神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療中發(fā)現(xiàn)了重要的效用。中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）領(lǐng)域的藥物發(fā)現(xiàn)歷來受到血腦屏障（BBB）治療方法有限的挑戰(zhàn)。由于TFRC在血腦屏障內(nèi)的腦毛細血管內(nèi)皮細胞表面高度表達，因此正在開發(fā)藥物遞送策略，以利用TFRC結(jié)合實體從血液到中樞神經(jīng)系統(tǒng)的轉(zhuǎn)胞作用（即受體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)運，或RMT）。目前的方法包括包被TFRC配體轉(zhuǎn)鐵蛋白的聚乙二醇化脂質(zhì)體，以及與攜帶治療有效載荷的納米顆粒（免疫脂質(zhì)體）連接的抗TFRC抗體。

轉(zhuǎn)鐵蛋白受體蛋白-1（TFRC）HEK293細胞系是經(jīng)過工程改造的HEK293細胞，可表達全長人類轉(zhuǎn)鐵蛋白受體蛋白-1（TFRC和TFR1，也稱為人CD71蛋白，GenBank登錄#NM_001128148），一種參與鐵穩(wěn)態(tài)的細胞表面受體。鐵穩(wěn)態(tài)失調(diào)與多種疾病，包括帕金森病、肌萎縮側(cè)索硬化癥（ALS）、亨廷頓氏病、，多發(fā)性硬化癥（MS）和腫瘤發(fā)生。通過流式細胞術(shù)驗證了該細胞系的表面表達TFRC可以用于多種應(yīng)用，如轉(zhuǎn)鐵蛋白內(nèi)吞作用研究和結(jié)合測定。

作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience熱銷產(chǎn)品轉(zhuǎn)鐵蛋白受體蛋白-1 (TFRC) HEK293 細胞系。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

應(yīng)用

? 在細胞環(huán)境中篩選或進行針對人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體-1設(shè)計的抗體的結(jié)合實驗。

? 研究轉(zhuǎn)鐵蛋白及其衍生物在細胞攝取實驗中的內(nèi)吞作用動力學(xué)，以開發(fā)下一代培養(yǎng)基配方。

? 初步評估針對轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的納米顆粒復(fù)合物（免疫脂質(zhì)體）的設(shè)計，這些復(fù)合物旨在通過跨細胞轉(zhuǎn)運將治療性有效載荷輸送過血腦屏障（BBB）。

細胞培養(yǎng)協(xié)議

細胞解凍

1. 推薦將液氮中冷凍的細胞快速在37°C水浴中解凍，然后將整個小瓶內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到含有10毫升解凍培養(yǎng)基1的試管中。

2. 離心細胞，去除上清液，并在5毫升預(yù)溫的解凍培養(yǎng)基1中重懸細胞。

3. 將重懸的細胞轉(zhuǎn)移到T25培養(yǎng)瓶中，并在37°C的5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4. 培養(yǎng)24小時后，額外添加約3毫升的解凍培養(yǎng)基1，并繼續(xù)在37°C的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，直到細胞準備好分裂。

5. 細胞應(yīng)在完全融合前分裂。在第一次傳代時，切換到生長培養(yǎng)基1C。

細胞傳代

1. 要傳代細胞，移除培養(yǎng)基，用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗細胞，并用0.25%的胰蛋白酶/EDTA從培養(yǎng)容器中分離細胞。

2. 分離后，加入生長培養(yǎng)基1C，轉(zhuǎn)移到試管中，離心細胞，重懸細胞于生長培養(yǎng)基1C中，并將適量的細胞懸浮液接種到新的培養(yǎng)容器中。次培養(yǎng)比例：每5天大約1:5。

細胞冷凍

1. 要冷凍細胞，移除培養(yǎng)基，用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗細胞，并用0.25%的胰蛋白酶/EDTA從培養(yǎng)容器中分離細胞。

2. 分離后，加入解凍培養(yǎng)基1并計數(shù)細胞，然后轉(zhuǎn)移到試管中，離心細胞，并在4°C的冷凍培養(yǎng)基（BPS Bioscience #79796）中重懸至約2 x 10^6細胞/毫升。

3. 將1毫升的細胞懸浮液分裝到每個冷凍小瓶中。將小瓶放置在保溫容器中緩慢冷卻，并在-80°C下過夜保存。

4. 次日轉(zhuǎn)移到液氮中保存。

數(shù)據(jù)展示：

圖1。流式細胞術(shù)驗證TFRC的表達。

使用PE偶聯(lián)的抗人TFRC抗體（抗CD71，BioLegend#334106）的流式細胞術(shù)檢測TFRC-HEK293重組細胞系（綠色）或親本HEK293細胞（藍色）。

相關(guān)產(chǎn)品：

HSP90α N-Terminal Domain Assay Kit 50293 96 reactions

HSP90? N-Terminal Domain Assay Kit 50294 384 reactions

Human EGFRvIII – CHO K1 Recombinant Cell Line (High or Low Expression) 78145 2 vials

BCMA CHO Recombinant Cell line (High or Low Expression) 79500 2 vials

CD20 CHO Recombinant Cell Line (High or Medium Expression) 79624 2 vials

HER2 (ERBB2) CHO Recombinant Cell Line (High, Medium or Low Expression) 79612 2 vials

SLAMF7 (CS1) CHO Recombinant Cell Line (High, Medium or Low Expression) 79608 2 vials

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學(xué)領(lǐng)域的供應(yīng)商，公司一直致力于開發(fā)藥物研發(fā)領(lǐng)域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立，從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領(lǐng)域的創(chuàng)新解決方案，以推動新的藥物發(fā)現(xiàn)。公司主要關(guān)注的領(lǐng)域包括免疫療法、表觀遺傳學(xué)、新型冠狀病毒、CRISPR、細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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