CBL-B驅(qū)動的Tyro3泛素化鏈內(nèi)TR-FRET檢測試劑盒是一種靈敏的高通量篩選（HTS）TR-FRETs檢測試劑盒，旨在以均勻的384反應(yīng)形式測量CBL-B E3連接酶活性。它利用銪標(biāo)記的泛素（供體）和Cy5標(biāo)記的泛堿（受體）來完成TR-FRET配對。由于TR-FRET-供體和受體都摻入了聚泛素鏈，這種基于FRET的檢測不需要耗時(shí)的洗滌步驟，使其特別適用于HTS應(yīng)用以及多泛素化的實(shí)時(shí)動力學(xué)分析。值得注意的是，該檢測試劑盒不能檢測到單泛素化。

或者，在相同的實(shí)驗(yàn)條件下，可以使用AXL激酶（BPS Bioscience#40180）代替Tyro3作為C-CBL泛素化底物。

泛素共價(jià)結(jié)合（Ub）是調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)穩(wěn)定性、功能和定位的主要翻譯后修飾。泛素化是三種酶的協(xié)同作用：泛素激活酶（E1）、泛素結(jié)合酶（E2）和泛素連接酶（E3）。泛素化的特異性和效率在很大程度上取決于E3酶，E3酶通過與E2?Ub綴合物和底物蛋白結(jié)合來指導(dǎo)Ub偶聯(lián)級聯(lián)的最后一步。這一步確保了Ub從E2-Ub轉(zhuǎn)移到底物，導(dǎo)致其單泛素化或多泛素化。

Casitas B系淋巴瘤原癌基因-B（CBL-B）是一種RING型E3連接酶，作為T細(xì)胞活化和生長因子受體和非受體酪氨酸激酶信號傳導(dǎo)的負(fù)調(diào)節(jié)因子。它包含一個(gè)N-末端酪氨酸激酶結(jié)合（TKB）結(jié)構(gòu)域，由一個(gè)四螺旋束、一個(gè)鈣結(jié)合EF手和一個(gè)Src同源（SH2）結(jié)構(gòu)域組成，后面是一個(gè)接頭螺旋區(qū)和負(fù)責(zé)其催化功能的RING結(jié)構(gòu)域。此外，CBL-B含有富含脯氨酸的區(qū)域，介導(dǎo)與酪氨酸和絲氨酸磷酸化位點(diǎn)的關(guān)聯(lián)，以及用于二聚化的泛素相關(guān)（UBA）/亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域。CBL-B與大量參與細(xì)胞增殖、分化和細(xì)胞形態(tài)控制的靶蛋白相互作用。CBL-B的泛素連接酶活性通過酪氨酸（Tyr）363的磷酸化上調(diào)，酪氨酸位于TKB和RING結(jié)構(gòu)域之間的螺旋接頭中。Tyr363的磷酸化使CBL-B從其自身抑制確認(rèn)中開放，使E2和底物與CBL-B結(jié)合。CBL-B例如被受體型酪氨酸激酶Tyro3磷酸化，Tyro3也是CBL-B在體外和體內(nèi)泛素化的底物。

圖1。CBL-B驅(qū)動的Tyro3泛素化鏈內(nèi)TR-FRET檢測試劑盒示意圖

作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BPS Bioscience熱銷產(chǎn)品CBL-B 驅(qū)動的 Tyro3 泛素化鏈內(nèi) TR-FRET 檢測試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

CBL-B 驅(qū)動的 Tyro3 泛素化鏈內(nèi) TR-FRET 檢測試劑盒：

同義詞：酪氨酸蛋白激酶受體，TYRO3，BYK，DTK，RSE，SKY，TIF，E3泛素蛋白連接酶CBL-B，Casitas B細(xì)胞淋巴瘤原癌基因b，指環(huán)蛋白56，指環(huán)型E3泛素轉(zhuǎn)移酶CBL-B，SH3結(jié)合蛋白CBL-B

試劑盒格式：TR-FRET（時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移）

物種：人類

提供形式：CBL-B驅(qū)動的Tyro3泛素化內(nèi)鏈TR-FRET試劑盒是一種敏感的高通量篩選（HTS）TR-FRET試劑盒，旨在均質(zhì)384反應(yīng)格式中測量CBL-B E3連接酶活性。

未提供但必需的材料：

能夠測量時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移（TR-FRET）的熒光微孔板閱讀器

可調(diào)微量移液器和無菌吸頭

旋轉(zhuǎn)或搖擺平臺

存儲/穩(wěn)定性：

當(dāng)按照指示存儲材料時(shí)，此試劑盒從收到之日起最佳性能可維持長達(dá)6個(gè)月。

應(yīng)用：

篩選抑制CBL-B Ub連接酶活性的分子，用于藥物發(fā)現(xiàn)HTS應(yīng)用

確定化合物IC50并進(jìn)行CBL-B實(shí)時(shí)動力學(xué)分析

運(yùn)輸溫度：-80°C

CBL-B 驅(qū)動的 Tyro3 泛素化鏈內(nèi) TR-FRET 檢測試劑盒產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫：

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認(rèn)證的生命科學(xué)領(lǐng)域的供應(yīng)商，公司一直致力于開發(fā)藥物研發(fā)領(lǐng)域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立，從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領(lǐng)域的創(chuàng)新解決方案，以推動新的藥物發(fā)現(xiàn)。公司主要關(guān)注的領(lǐng)域包括免疫療法、表觀遺傳學(xué)、新型冠狀病毒、CRISPR、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BPS Bioscience以及客戶訂制化服務(wù)。