該產(chǎn)品的目的是定量測試樣本中人類因子P的含量。該產(chǎn)品僅供經(jīng)過培訓(xùn)的實驗室人員使用。不得使用結(jié)果用于臨床診斷或患者管理。僅供研究使用。

艾美捷Svar Life Science補(bǔ)體P因子定量檢測試劑盒（#COMPL FPQ RUO）內(nèi)容：

一個帶有微孔板（12x8）的框架，涂有抗因子P單克隆抗體，密封在帶有干燥袋的箔包裝中。

3.0毫升裝有校準(zhǔn)液（200納克/毫升）的小瓶。準(zhǔn)備使用。校準(zhǔn)液必須根據(jù)9.1.2節(jié)的說明進(jìn)一步稀釋。

1.5毫升低濃度對照（LC），綠色，綠色蓋子。準(zhǔn)備使用。

1.5毫升高濃度對照（HC），紅色，紅色蓋子。準(zhǔn)備使用。

2個32毫升稀釋液（Dil），紅色。準(zhǔn)備使用。

30毫升洗滌液，30倍濃縮。

15毫升含有針對因子P的HRP標(biāo)記抗體的結(jié)合物，藍(lán)色，棕色瓶。準(zhǔn)備使用。

15毫升底物TMB，棕色瓶。準(zhǔn)備使用。

15毫升終止液（0.5M H2SO4）。準(zhǔn)備使用。

需要但未提供的物料或設(shè)備

帶有450納米和620納米濾光片的微孔板讀取器

軌道搖床（除非微孔板讀取器包含此功能）

帶有一次性吸頭的精密移液器

96孔板或條的洗滌器

吸水紙

試劑和樣本稀釋用的容器

計時器

補(bǔ)體P因子定量檢測試劑盒測定原理：

P因子定量測定是一種用于定量人P因子的夾心ELISA例如，血清或血漿樣本。該測定基于固定化96孔板中的抗體，捕獲孵育的測試樣本中存在的因子P在盤子里。用標(biāo)記有以下物質(zhì)的二抗檢測結(jié)合因子PHRP。HRP隨后催化底物的切割，誘導(dǎo)顏色與測試樣品中因子P濃度相關(guān)的變化。

穩(wěn)定性和儲存：

試劑應(yīng)儲存在2-8°C。在2-8°C下儲存時，稀釋的洗滌液為在試劑盒有效期之前保持穩(wěn)定。

Svar Life Science補(bǔ)體P因子定量檢測試劑盒結(jié)果評估：

對于每個數(shù)據(jù)點，從450納米波長減去620納米參考波長，并計算所有重復(fù)樣本的平均吸光度值。

通過繪制六個校準(zhǔn)品的吸光度與濃度（0納克/毫升、12.5納克/毫升、25納克/毫升、50納克/毫升、100納克/毫升和200納克/毫升）的校準(zhǔn)曲線。

在這個應(yīng)用說明（圖2）的示例中使用了4參數(shù)曲線擬合，但用戶可以選擇不同的曲線擬合方式。根據(jù)校準(zhǔn)曲線讀取未知樣本的濃度。

注意：為了計算樣本中因子P的濃度，必須根據(jù)上述協(xié)議進(jìn)行稀釋補(bǔ)償，即200倍。如果選擇了不同的樣本稀釋度，應(yīng)相應(yīng)進(jìn)行補(bǔ)償。

圖:校準(zhǔn)器曲線示例

請注意：上圖顯示了一個標(biāo)準(zhǔn)曲線的示例，不應(yīng)用于實際樣品解釋。

補(bǔ)體P因子定量檢測試劑盒文獻(xiàn)參考：

1.Cortes, C.; Ohtola, J. A.; Saggu, G.; Ferreira, V. P. Local Release of Properdin in the Cellular

Microenvironment: Role in Pattern Recognition and Amplification of the Alternative Pathway of Complement.Front Immunol 2013, 3.

2.Pangburn, M. K. Analysis of the Natural Polymeric Forms of Human Properdin and Their Functions in Complement Activation. The Journal of Immunology 1989, 142 (1), 202–207.

3.Smith, C. A.; Pangburn, M. K.; Vogel, C. W.; Müller-Eberhard, H. J. Molecular Architecture of Human Properdin, a Positive Regulator of the Alternative Pathway of Complement. J. Biol. Chem. 1984, 259 (7),4582–4588.