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常見的細胞增殖的方法主要包括:MTT法、WST-1法、CCK-8法,這些主要是基于檢細胞活性,從而反映出總體的增殖效果,卻無法檢測到單個的增殖細胞。公認的最精確的檢測細胞增殖的方法是直接檢測細胞中DNA的合成,此前最常用的就是BrdU法,但是方法則需要DNA變性(如酸變性、熱變性或者用DNase消化)去暴露BrdU,從而與BrdU抗體結合,整個實驗影響因素較多,穩(wěn)定性比較差。
Abbkine針對這一應用難點,創(chuàng)新開發(fā)了基于EdU摻入和后續(xù)的點擊反應的EdU法:
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 熒光特性 |
| Cell Proliferation EdU Image Kit (Green Fluorescence) 細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光) | KTA2030 | AbFluor 488 Ex/Em = 501/525 nm |
| Cell Proliferation EdU Image Kit (Orange Fluorescence) 細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光) | KTA2031 | AbFluor 545 Ex/Em = 546/565 nm |
原理:EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中另一方面,EdU上的乙炔基能與熒光標記的小分子疊氮化物探針(如AbFluor 488 azid,AbFluor 545 azide等)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Click reaction)(30分鐘完成)。

點擊反應 Click reactin
| 試劑盒組分: | 試劑盒優(yōu)勢: |
| • EdU (10mM) • AbFluor 488和545 疊氮化物 • 10×反應緩沖液 • 含銅試劑 • 還原劑 | • 無須抗體。 • 無變性步驟,保持細胞形態(tài)和DNA完整性。 • 簡單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。 • 專利的AbFluor 488和545 azide具有良好的光穩(wěn)定性與抗淬滅性。 • 針對熒光顯微鏡進行優(yōu)化。 |
結果展示:
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| KTA2030成像:Hela細胞(綠色) | KTA2031成像:Hela細胞(紅色) |
說明書下載:
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Abbkine專注于免疫學和細胞學領域,致力于創(chuàng)新和研發(fā)各類抗體、蛋白質、分析試劑與試劑盒,以期成為生命科學研究發(fā)展、藥物研發(fā)等領域的關鍵推動者。在這里,我們?yōu)槟诗I蛋白和免疫研究用戶最喜愛的產(chǎn)品,從免疫學基礎產(chǎn)品,如蛋白提取定量,到免疫學實驗的內參標簽抗體、一抗及二抗等;細胞研究用戶最喜愛的產(chǎn)品,從用于檢測細胞狀態(tài)的染料及試劑盒,細胞器提取試劑盒,細胞亞結構染色示蹤及細胞代謝檢測產(chǎn)品,到用于細胞培養(yǎng)的細胞因子及蛋白類檢測試劑盒,只為助力您的研究事業(yè)!
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