一、產(chǎn)品基本信息

屬性 | 詳細(xì)信息

靶種屬 | 小鼠

宿主 | 驢

抗體形式 | 全 IgG

特異性 | IgG（H+L，即重鏈和輕鏈）

最小交叉反應(yīng) | 牛、雞、山羊、豚鼠、敘利亞倉(cāng)鼠、馬、人、兔、綿羊血清蛋白

標(biāo)記物 | Cyanine Cy3

產(chǎn)品類別 | 親和純化全 IgG 抗體

克隆性 | 多克隆

二、產(chǎn)品描述

本品為驢源抗小鼠 IgG 二抗，經(jīng)免疫親和層析純化，采用 Cy3 熒光染料標(biāo)記。由Jackson推出，艾美捷代理。基于免疫電泳和/或 ELISA 驗(yàn)證，該抗體可與小鼠 IgG 全分子反應(yīng)，同時(shí)也能識(shí)別其他小鼠免疫球蛋白亞類的輕鏈。經(jīng)檢測(cè)，未發(fā)現(xiàn)與非免疫球蛋白血清蛋白的交叉反應(yīng)。

該抗體已通過(guò) ELISA 及/或固相吸附驗(yàn)證，確保與牛、雞、山羊、豚鼠、敘利亞倉(cāng)鼠、馬、人、兔、綿羊血清蛋白的最小交叉反應(yīng)。但仍可能與其他種屬的免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)，建議用戶在實(shí)驗(yàn)中設(shè)置適當(dāng)?shù)膶?duì)照。

抗體形式：全 IgG 的特性

本產(chǎn)品為全 IgG 形式，即從抗血清中通過(guò)免疫親和層析分離得到的完整抗體分子。全 IgG 包含一個(gè) Fc 片段和兩個(gè)通過(guò)二硫鍵連接的抗原結(jié)合 Fab 片段，因此為二價(jià)抗體，平均分子量約為 160 kDa。全 IgG 形式適用于絕大多數(shù)免疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)（如免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)、免疫組化等），且性價(jià)比最高。

三、物理狀態(tài)與儲(chǔ)存條件

凍干粉狀態(tài)

物理狀態(tài)：凍干固體

儲(chǔ)存溫度：2–8°C（凍干粉）

產(chǎn)品規(guī)格單中注明了復(fù)溶所需去離子水的體積，請(qǐng)按指示操作。

復(fù)溶方法

1. 加入指定體積的去離子水（參見(jiàn)產(chǎn)品規(guī)格書(shū)）。

2. 輕輕混勻，若溶液未完全澄清，可短暫離心去除不溶物。

3. 工作稀釋液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。

4. 復(fù)溶后的未稀釋液體在 2–8°C 下穩(wěn)定約 6 周。

長(zhǎng)期儲(chǔ)存（復(fù)溶后）

分裝凍存：分裝后于 -70°C 或以下冷凍保存。避免反復(fù)凍融。

甘油保存法：加入等體積的甘油（ACS 級(jí)或更優(yōu)），使甘油終濃度為 50%，混勻后于 -20°C 以液體形式保存。

有效期：自復(fù)溶之日起 1 年。若檢測(cè)結(jié)果符合預(yù)期用途，可適當(dāng)延長(zhǎng)有效期。

純化與緩沖體系

參數(shù) | 說(shuō)明

純化方法 | 使用瓊脂糖偶聯(lián)抗原進(jìn)行免疫親和層析

緩沖液 | 0.01 M 磷酸鈉，0.25 M NaCl，pH 7.6

穩(wěn)定劑 | 15 mg/ml 牛血清白蛋白（無(wú) IgG、無(wú)蛋白酶）

防腐劑 | 0.05% 疊氮化鈉

注意：疊氮化鈉可能抑制某些酶標(biāo)記體系（如 HRP），若用于酶聯(lián)檢測(cè)，請(qǐng)適當(dāng)考慮。

四、推薦工作濃度與稀釋范圍

稀釋比例：1:100 – 1:800（適用于大多數(shù)應(yīng)用）

稀釋倍數(shù)以范圍形式提供，因?yàn)樽罴严♂尪热Q于多種因素，包括：

抗原密度

細(xì)胞/組織的通透性

樣本類型（冰凍切片、石蠟切片、細(xì)胞爬片等）

檢測(cè)設(shè)備靈敏度

建議：首次使用時(shí)，對(duì)該稀釋范圍進(jìn)行梯度預(yù)實(shí)驗(yàn)（例如 1:100、1:200、1:400、1:800），以確定特定實(shí)驗(yàn)體系中的最佳工作濃度。

五、Cy3 熒光染料特性

Cy3 是一種橙紅色熒光染料，與傳統(tǒng)的四甲基羅丹明（TRITC）相比，具有更亮、更耐光猝滅、背景更低的優(yōu)點(diǎn)。

光學(xué)參數(shù) | 數(shù)值

最大激發(fā)波長(zhǎng)（Amax） | 550 nm

最大發(fā)射波長(zhǎng)（Emax） | 570 nm

濾光片兼容性

熒光顯微鏡：可使用傳統(tǒng)的 TRITC 濾光片組，因?yàn)?Cy3 的激發(fā)和發(fā)射光譜與 TRITC 幾乎相同。推薦將 Cy3 作為 TRITC 的更亮替代品。

激光激發(fā)：

氬離子激光（514 nm 或 528 nm 譜線）：可激發(fā)約 50% 的最大強(qiáng)度。

氦氖激光（543 nm 譜線）或汞燈（546 nm 譜線）：可激發(fā)約 75% 的最大強(qiáng)度。

六、多色成像建議

與 FITC 雙標(biāo)：建議使用窄帶通發(fā)射濾光片檢測(cè) FITC，以最大程度減少 Cy3 在 FITC 通道中的串色。

與 Alexa Fluor 647 多標(biāo)：Cy3 可與 AF647 搭配用于共聚焦顯微鏡。如需更理想的光譜間隔（介于綠色熒光染料如 AF488 與遠(yuǎn)紅染料如 AF647 之間），可考慮 Rhodamine Red-X。

七、應(yīng)用場(chǎng)景

本產(chǎn)品適用于以下實(shí)驗(yàn)技術(shù)（需根據(jù)實(shí)驗(yàn)體系優(yōu)化稀釋倍數(shù)）：

免疫熒光（IF）：細(xì)胞爬片、冰凍切片、石蠟切片。

流式細(xì)胞術(shù)（FACS）：細(xì)胞表面或胞內(nèi)染色。

免疫組化（IHC）：尤其適用于需要多重染色的組織切片。

其他需要橙紅色熒光檢測(cè)的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。

八、質(zhì)量控制與驗(yàn)證

通過(guò)免疫電泳和/或 ELISA 確認(rèn)抗體與小鼠 IgG 全分子的反應(yīng)性。

通過(guò)固相吸附確認(rèn)對(duì)多種常見(jiàn)種屬血清蛋白的交叉反應(yīng)最小化。

未檢測(cè)到針對(duì)非免疫球蛋白血清蛋白的抗體，表明純度和特異性良好。

九、操作注意事項(xiàng)

1. 復(fù)溶后澄清度：若復(fù)溶后溶液渾濁，應(yīng)以最大速度離心 5–10 分鐘，取上清使用。

2. 避免反復(fù)凍融：分裝凍存是維持活性的最佳方法。若采用甘油保存法，可直接從 -20°C 取用液體，無(wú)需反復(fù)凍融。

3. 工作液穩(wěn)定性：稀釋后的工作液應(yīng)在當(dāng)日使用完畢，不建議保存。

4. 避光操作：Cy3 為熒光染料，所有操作及孵育步驟應(yīng)盡量避免強(qiáng)光直射，以保持熒光信號(hào)強(qiáng)度。

5. 防腐劑兼容性：疊氮化鈉對(duì)活細(xì)胞有毒，若用于活細(xì)胞染色，需通過(guò)透析或稀釋降低疊氮化鈉濃度。

警告：本產(chǎn)品僅限研究使用，不適用于人類或獸醫(yī)診斷治療。