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蛋白酶金黃色葡萄球菌V8(內(nèi)蛋白酶-Glu-C)特異性地切割天冬氨酸或谷氨酸COOH末端的肽鍵。在銨存在下,酶特異性僅限于谷氨酸位點。它的分子量為27,000道爾頓,最佳pH值為4.0和7.8,以血紅蛋白為底物。蛋白酶金黃色葡萄球菌V8被二異丙基氟磷酸鹽和一價陰離子如F-,Cl-,CH3COO-和NO3抑制。酶活性由Drapeau描述的酪蛋白消化測定法測定(方法Enzymol.,45,469,1976)。
作為Worthington全國總代理,艾美捷科技強烈推薦Worthington主要產(chǎn)品蛋白酶,金黃色葡萄球菌(內(nèi)蛋白酶Glu-C)。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 詳情 |
| 蛋白酶,金黃色葡萄球菌(內(nèi)蛋白酶Glu-C) | WBC-LS003608 | 查看 |
穩(wěn)定性/存儲:自溶發(fā)生在高于40°C的溫度下。 該酶在USP 0.2%SDS中完全活躍。在12-2°C下可穩(wěn)定保存8個月。
測定方案:
方法
酶活性由Drapeau(1976)描述的酪蛋白消化測定法確定。由于底物級酪蛋白可能因批次和生產(chǎn)方式而異,酪蛋白消化測定的標準化一直難以實現(xiàn)。建議使用參比酶制劑。一個單位是釋放相當于 0.001 A 的酸溶性片段的酶量280在指定條件下,在 37°C 和 pH 7.8 下每分鐘。
試劑
1% 酪蛋白在 0.05 M Tris?PO 中4緩沖液,pH 7.8。(將1克“Hammersten”酪蛋白溶解在50毫升0.01N NaOH中,輕輕加熱和攪拌。加入40毫升試劑級水和5.0毫升1.0M Tris。用H將pH調(diào)節(jié)至7.83采購訂單4和 q.s. 至 100 毫升。
10%三氯乙酸
酶
以 1 mg/ml 的速度溶解在試劑級水中。
程序
用 5.0 ml 1% 酪蛋白在 37°C 下平衡一系列試管 5 分鐘。零時加入 10 ul 或 20 ul 酶。混合。包括試劑空白。加入樣品后正好十分鐘,通過加入5.0ml TCA停止反應。混合。讓試管靜置十分鐘,然后過濾。閱讀 A280的濾液。
計算
單位/毫克 = (一個280測試 - 一個280試劑空白)/反應中10分鐘x mg酶
蛋白酶,金黃色葡萄球菌(內(nèi)蛋白酶Glu-C)相關產(chǎn)品:
羧肽酶 B (COBC/COBPMS)羧肽酶 Y (COY)胰凝乳蛋白酶 (CDAG/CDI/CDS/CDTLCK)梭狀蛋白酶、內(nèi)切-Arg-C (CP)中性蛋白酶(分散酶、NPRO)蛋白酶 K (PROK)胰蛋白酶 (TL/TRL/TRL3/TRLS/TRTPCK)胰蛋白酶,SequENZ (TRSEQII/TRSEQZ)
蛋白酶,金黃色葡萄球菌(內(nèi)蛋白酶Glu-C)部分引用文獻:
Cleveland, D. , Fischer, S. , Kirschner, M. and Laemmli, U.
Peptide Mapping by Limited Proteolysis in Sodium Dodecyl Sulfate and Analysis by Gel Electrophoresis , J Biol Chem 252 , 1102 , 1977
Drapeau, G.
Protease from Staphylococcus aureus , Methods in Enzymology Vol. 45B , L. Lorand , Academic Press, NY , 469 , 1974
Drapeau, G. , Boily, Y. and Houmard, J.
Purification and Properties of an Extracellular Protease of Staphylococcus aureus , J Biol Chem 247 , 6720 , 1972
Drapeau, G.
The Primary Structure of Staphylococcal Protease , Can J Biochem 56 , 534 , 1978
Dugas, H. , Gaudet, F. and Leduc, P.
Structural Studies of Staphylococcal Protease. III. Binding of Anions to the Spin-Labeled Enzyme , Can J Biochem 56 , 7 , 1977
酶是Worthington的主要產(chǎn)品線。從技術上講,Worthington實際上并不制造酶,而是從各種動植物組織和各種微生物來源(如細菌、真菌和霉菌)中提取酶。根據(jù)該酶在材料中的普遍性選擇特定酶的起始材料。例如,一種功能涉及使肌肉工作的酶將主要存在于肌肉組織中,因此起始材料可能是兔肌肉或豬心;參與發(fā)酵的酶最好在酵母中找到。 Worthington使用的一些動物組織包括牛胰腺、豬腎、牛眼、馬肝、兔肌肉、牛肝、豬心、馬血和小牛腸。各種蛋白質(zhì)也從辣根、紅薯、杏仁和美洲商陸中提取。一些產(chǎn)品是從大腸桿菌、幾種梭狀芽胞桿菌和各種其它細菌中分離出來的。還使用酵母、蘑菇、全脂牛奶和雞蛋等。
Worthington是一家通過的ISO9001認證的家族企業(yè)。主要生產(chǎn)用于生物技術和生命科學研究,診斷,生物制藥和生物加工應用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。作為生命科學領域知名的酶類供應商,以及細胞分離酶的專家級公司,其核心酶產(chǎn)品包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。

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