Clostripain（內(nèi)蛋白酶-Arg-C）是一種與膠原酶相關的雙鏈蛋白酶，從溶組織梭菌中分離出來。它對精氨酸的羧基肽鍵具有高度特異性。克洛帕因有巰基需求;它被二硫蘇糖醇、半胱氨酸或其他含巰基的試劑活化。鈣離子的存在是必不可少的。該酶被氧化劑和巰基反應物以及Co2+，Cu2+，Cd2+和重金屬離子抑制。檸檬酸鹽、硼酸鹽和Tris陰離子的抑制作用較小。   

作為Worthington全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Worthington主要產(chǎn)品Clostripain（內(nèi)蛋白酶-Arg-C）。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。  

穩(wěn)定性/存儲：自溶發(fā)生在高于40°C的溫度下。 該酶在USP 0.2%SDS中完全活躍。在12-2°C下可穩(wěn)定保存8個月。   

測定方案： 

方法 

反應速度測量為N-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯水解引起的253nm處吸光度的增加。在規(guī)定的條件下，一個單位在 25°C 和 pH 7.6 下每分鐘水解一微摩爾的 BAEE。 

試劑

0.075 M 磷酸鈉緩沖液，pH 7.6 

7.5 毫米二硫蘇糖醇 

0.75 mM N-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯 （BAEE） 

1.0 mM乙酸鈣含有2.5 mM二硫蘇糖醇（活化溶液） 

酶

將酶溶解或稀釋在水中濃度為1mg / ml。在測定之前，將酶進一步稀釋在含有1.0mM二硫蘇糖醇的2.5mM乙酸鈣中至0.2-0.8單位/ ml的濃度。 

程序

將分光光度計調(diào)整至 253 nm 和 25°C。 按如下方式移液到每個比色皿中：

在分光光度計中孵育3-5分鐘以達到溫度平衡并確定空白率（如果有）。在零時間，加入0.1ml適當稀釋的酶并記錄A₂₅₃4-5分鐘。確定 ΔA₂₅₃/分鐘距曲線的線性部分。注意：當ΔA時，反應相對于酶濃度似乎是最線性的₂₅₃/min 介于 0.007 和 0.030 之間。

Clostripain（內(nèi)蛋白酶-Arg-C）相關產(chǎn)品：

羧肽酶 B （COBC/COBPMS）羧肽酶 Y （COY）胰凝乳蛋白酶 （CDAG/CDI/CDS/CDTLCK）膠原酶 （CLS1-4/CLSPA）彈性蛋白酶 （ES/ESL/ESFF）中性蛋白酶（分散酶，NPRO）木瓜蛋白酶（PAP/PAPL/PAP2）胃蛋白酶（PM）蛋白酶，金黃色葡萄球菌，內(nèi)切-葡聚糖-C （STAP）蛋白酶K （PROK）胰蛋白酶（TL/TRL/TRL3/TRLS/TRTPCK）胰蛋白酶，序列ENZ （TRSEQII/TRSEQZ）胰蛋白酶抑制劑（LBI/OI/SI/SIC） 

Clostripain（內(nèi)蛋白酶-Arg-C）部分引用文獻：

Gilles, A. , Imhoff, J. and Keil, B. 

Chemical Chacterization, Activity, and Thiol Content of the Highly Active Form of Clostripain , J Biol Chem 254 , 1462 , 1979 

Gilles, A. , Lecroisey, A. and Keil, B. 

Primary Structure of alpha-Clostripain Light Chain , Eur J Biochem 145 , 469 , 1984 

Homandberg, G. , Komoriya, A. and Chaiken, I. 

Enzymatic Condensation of Nonassociated Peptide Fragments Using a Molecular Trap , Biochemistry 3385 , 3385 , 1982

酶是Worthington的主要產(chǎn)品線。從技術上講，Worthington實際上并不制造酶，而是從各種動植物組織和各種微生物來源（如細菌、真菌和霉菌）中提取酶。根據(jù)該酶在材料中的普遍性選擇特定酶的起始材料。例如，一種功能涉及使肌肉工作的酶將主要存在于肌肉組織中，因此起始材料可能是兔肌肉或豬心；參與發(fā)酵的酶最好在酵母中找到。 Worthington使用的一些動物組織包括牛胰腺、豬腎、牛眼、馬肝、兔肌肉、牛肝、豬心、馬血和小牛腸。各種蛋白質(zhì)也從辣根、紅薯、杏仁和美洲商陸中提取。一些產(chǎn)品是從大腸桿菌、幾種梭狀芽胞桿菌和各種其它細菌中分離出來的。還使用酵母、蘑菇、全脂牛奶和雞蛋等。   

Worthington是一家通過的ISO9001認證的家族企業(yè)。主要生產(chǎn)用于生物技術和生命科學研究，診斷，生物制藥和生物加工應用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。作為生命科學領域知名的酶類供應商，以及細胞分離酶的專家級公司，其核心酶產(chǎn)品包括：膠原蛋白酶，脫氧核糖核酸酶I，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。