S-腺苷甲硫氨酸（SAM）是一種甲基供體，參與將甲基轉(zhuǎn)移至DNA、蛋白質(zhì)、磷脂、RNA和神經(jīng)遞質(zhì)。分解和再生SAM的反應(yīng)被稱為SAM循環(huán)。SAM依賴的甲基化酶使用SAM作為底物，生成S-腺苷同型半胱氨酸（SAH），隨后SAH被S-腺苷同型半胱氨酸水解酶進(jìn)一步分解為同型半胱氨酸和腺苷。同型半胱氨酸可以通過(guò)蛋氨酸合成酶重新生成蛋氨酸，最終再次生成SAM。

SAM甲基基團(tuán)的轉(zhuǎn)移將SAM轉(zhuǎn)化為SAH，后者是一種強(qiáng)效的甲基化抑制劑。因此，SAM/SAH比值被用作衡量細(xì)胞甲基化潛力的指標(biāo)。研究表明，冠狀動(dòng)脈疾病患者的全血SAM水平低于正常人。內(nèi)皮依賴性血管舒張與SAM水平的增加相關(guān)。此外，在非糖尿病個(gè)體中，高SAM水平與頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度的減少有關(guān)。

艾美捷S-腺苷甲硫氨酸(SAM)ELISA試劑盒（#MET-5152）是一種競(jìng)爭(zhēng)性酶免疫分析方法，用于檢測(cè)和定量血漿、血清、裂解液或其他生物液體樣本中的SAM。該試劑盒對(duì)游離SAM的檢測(cè)靈敏度限為0.625納摩爾/升。每套試劑盒提供的試劑足以進(jìn)行多達(dá)96次測(cè)定，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線和未知樣本。

相關(guān)產(chǎn)品：

1. MET-5151-C：S-腺苷甲硫氨酸（SAM）和S-腺苷同型半胱氨酸ELISA組合試劑盒

2. MET-5090：腺苷測(cè)定試劑盒（熒光法）

3. MET-5158：蛋氨酸測(cè)定試劑盒（熒光法）

4. MET-5163：ATP測(cè)定試劑盒（熒光法）

5. MET-5125：丙酮酸測(cè)定試劑盒（比色法）

S-腺苷甲硫氨酸(SAM)ELISA試劑盒組成：

盒子1（室溫運(yùn)輸）

1. 96孔蛋白結(jié)合板（部件編號(hào)231001）：一個(gè)96孔條板。

2. 二抗，HRP偶聯(lián)物（1000倍）（部件編號(hào)230003）：一個(gè)20微升小瓶。

3. 測(cè)定稀釋液（部件編號(hào)310804）：一個(gè)50毫升瓶。

4. 10倍洗滌緩沖液（部件編號(hào)310806）：一個(gè)100毫升瓶。

5. 底物溶液（部件編號(hào)310807）：一個(gè)12毫升琥珀色瓶。

6. 終止液（部件編號(hào)310808）：一個(gè)12毫升瓶。

盒子2（干冰運(yùn)輸）

1. SAM偶聯(lián)物（100倍）（部件編號(hào)267201）：一個(gè)100微升小瓶。

2. SAM標(biāo)準(zhǔn)品（部件編號(hào)51521D）：一個(gè)40微升小瓶，含有1.2微摩爾/升穩(wěn)定形式的游離S-腺苷甲硫氨酸。

3. 抗SAM抗體（500倍）（部件編號(hào)267202）：一個(gè)15微升小瓶。

未提供的材料：

1. 磷酸鹽緩沖液（PBS）

2. 含0.1%牛血清白蛋白（BSA）的PBS

儲(chǔ)存條件：

收到后，將SAM偶聯(lián)物和SAM標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存于-80攝氏度。將試劑盒中的其他組分儲(chǔ)存于4攝氏度。

試劑準(zhǔn)備：

- SAM偶聯(lián)物包被板：確定所需孔數(shù)，將SAM偶聯(lián)物在PBS中稀釋1:100。向96孔蛋白結(jié)合板的每個(gè)孔中加入100微升1倍SAM偶聯(lián)物。在4攝氏度下孵育過(guò)夜。移除稀釋后的SAM偶聯(lián)物，用紙巾吸干孔中的多余液體。用200微升PBS洗滌孔3次，并用紙巾吸干多余液體。向每個(gè)孔中加入200微升測(cè)定稀釋液，并在室溫下封閉1小時(shí)。將板轉(zhuǎn)移到4攝氏度，直到開(kāi)始測(cè)定。

 注意：SAM偶聯(lián)物包被板不能長(zhǎng)期穩(wěn)定保存。建議在包被后24小時(shí)內(nèi)使用。

- 1倍洗滌緩沖液：用去離子水將10倍洗滌緩沖液稀釋至1倍。攪拌至均勻。

- 抗SAM抗體和二抗HRP偶聯(lián)物：使用前，用測(cè)定稀釋液將抗SAM抗體稀釋1:500，二抗HRP偶聯(lián)物稀釋1:1000。不要儲(chǔ)存稀釋后的溶液。

樣本準(zhǔn)備：

以下建議僅供參考，可根據(jù)用戶實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行調(diào)整以優(yōu)化結(jié)果。

- 血漿：用肝素或EDTA收集血液，并在4攝氏度下以1000×g離心10分鐘。移取血漿并立即進(jìn)行測(cè)定，或在-80攝氏度下保存，最長(zhǎng)可達(dá)三個(gè)月。正常血漿樣本應(yīng)在進(jìn)行ELISA前立即用含0.1% BSA的PBS稀釋2-10倍。

- 血清：收集血清，并在4攝氏度下以1000×g離心10分鐘。立即進(jìn)行測(cè)定，或在-80攝氏度下保存，最長(zhǎng)可達(dá)三個(gè)月。正常血清樣本應(yīng)在進(jìn)行ELISA前立即用含0.1% BSA的PBS稀釋2-10倍。

- 組織勻漿：稱重并在冰上將組織在每克組織5-10毫升冷PBS中勻漿。在4攝氏度下以10,000×g離心15分鐘。移取上清液并置于冰上。將未使用的上清液在-80攝氏度下保存，最長(zhǎng)可達(dá)三個(gè)月。

- 細(xì)胞裂解液：通過(guò)在4攝氏度下以2000×g離心10分鐘收集細(xì)胞。在冰上用1-2毫升冷PBS超聲處理或勻漿細(xì)胞沉淀。在4攝氏度下以10,000×g離心15分鐘。移取上清液并置于冰上。將上清液分裝后用于測(cè)定。將未使用的上清液在-80攝氏度下保存，最長(zhǎng)可達(dá)三個(gè)月。

- 其他生物液體：在4攝氏度下以1000×g離心10分鐘，并回收上清液。立即進(jìn)行測(cè)定，或在-80攝氏度下保存，最長(zhǎng)可達(dá)三個(gè)月。

結(jié)果示例：

下圖展示了SAM ELISA試劑盒的典型結(jié)果。以下數(shù)據(jù)僅供參考，不應(yīng)用于解釋實(shí)際結(jié)果。

圖上：SAM標(biāo)準(zhǔn)曲線。

圖下：人血清和血漿中SAM的檢測(cè)。

S-腺苷甲硫氨酸(SAM)ELISA試劑盒文獻(xiàn)參考：

1. Hirsch S, Ronco AM, Guerrero-Bosagna C, de la Maza MP, Liva L, Barrera G, Llanos M, Alliende

MA, Silva F, and Bunout D (2008) Nutrition. 11-12:1103-1109.

2. Pey AL, Majtan T, Sanchez-Ruiz JM, and Kraus JP (2013) Biochem J. 449: 109-121

3. Yi P, Melnyk S, Pogribna M, Pogribny IP, Hine RJ, and James SJ (2000) J. Biol. Chem.275:29318-29323.

4.Stabler SP and Allen RH (2004) Clin. Chem. 50: 365-372.