腺苷二磷酸（ADP）是一種在多種細(xì)胞過程中發(fā)揮能量傳遞作用的有機(jī)分子，例如引發(fā)神經(jīng)沖動(dòng)、肌肉收縮和化學(xué)物質(zhì)合成的酶促反應(yīng)。ADP存在于所有生物體中，由三個(gè)部分組成：含氮堿基（腺嘌呤）、糖（核糖）和焦磷酸基團(tuán)。在產(chǎn)生ATP的一系列酶促反應(yīng)（如糖酵解或氧化磷酸化）中，ADP會(huì)被消耗。在植物中，陽光通過光合作用將ADP轉(zhuǎn)化為ATP。代謝消耗后，ATP會(huì)被轉(zhuǎn)化為腺苷二磷酸（ADP）或腺苷單磷酸（AMP）。

Cell BioLabs的ADP檢測試劑盒是一種簡單的熒光法檢測方法，可在96孔微孔板格式中測量生物樣本中總ADP的含量。每個(gè)試劑盒提供足夠的試劑進(jìn)行多達(dá)100次檢測（包括空白、ADP標(biāo)準(zhǔn)品和未知樣本）。通過與已知濃度的ADP標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較，確定樣本中的ADP濃度。該試劑盒的檢測靈敏度下限為3.1 ?M ADP。

注意：每個(gè)樣本重復(fù)需要2次檢測，一次用丙酮酸激酶處理（+PK），一次不處理（-PK）。ADP的計(jì)算基于兩個(gè)孔的相對熒光單位（RFU）讀數(shù)差異。

作為Cell Biolabs全國總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品ADP檢測試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

ADP檢測試劑盒檢測原理：

Cell BioLabs的ADP檢測試劑盒用于測量生物樣本中的總ADP。ADP和磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）在丙酮酸激酶的作用下被轉(zhuǎn)化為ATP和丙酮酸。隨后，丙酮酸在丙酮酸氧化酶的作用下，在磷酸和氧氣存在的情況下被氧化為乙酰磷酸、二氧化碳和過氧化氫。生成的過氧化氫通過高特異性的熒光探針進(jìn)行檢測。辣根過氧化物酶催化探針與過氧化氫之間的反應(yīng)，二者以1:1的比例結(jié)合。樣本和標(biāo)準(zhǔn)品在96孔微孔板格式中進(jìn)行比較，孵育30分鐘后，使用標(biāo)準(zhǔn)96孔熒光板讀數(shù)器讀取結(jié)果。

相關(guān)產(chǎn)品  

1. MET-5163：ATP檢測試劑盒  

2. MET-5090：腺苷檢測試劑盒  

3. MET-5158：甲硫氨酸檢測試劑盒  

4. MET-5152：S-腺苷甲硫氨酸ELISA試劑盒  

5. MET-5029：丙酮酸檢測試劑盒（熒光法）

試劑盒組成  

盒子1（藍(lán)色冰袋運(yùn)輸）  

1. ADP標(biāo)準(zhǔn)品（部件號51641C）：1管50 ?L，濃度為20 mM。  

2. 氯化鎂（MgCl?）（部件號51623A）：1管200 ?L，濃度為1 M。  

3. 磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）（部件號51585C）：1管50 ?L，濃度為100 mM。  

4. 丙酮酸激酶（部件號51625D）：1管200 ?L。  

5. 丙酮酸氧化酶（部件號50295C）：1管300 ?L。  

6. 熒光探針（部件號50231C）：1管50 ?L，溶于DMSO。  

7. 辣根過氧化物酶（HRP）（部件號234402-T）：1管10 ?L，濃度為100 U/mL，溶于甘油。  

8. 黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）（部件號50293C）：1管50 ?L，濃度為2 mM。  

9. 硫胺素焦磷酸（TPP）（部件號50294C）：1管50 ?L，濃度為2 mM。  

盒子2（藍(lán)色冰袋運(yùn)輸）  

1. 中和緩沖液（部件號51634A）：1瓶25 mL。  

2. 10倍檢測緩沖液（部件號51622A）：1瓶25 mL。

未提供材料  

1. 蒸餾水或去離子水  

2. 10 kDa分子量截留（MWCO）離心過濾器（例如Amicon Ultra 0.5 mL）  

3. 標(biāo)準(zhǔn)96孔黑色熒光微孔板和/或黑色細(xì)胞培養(yǎng)微孔板  

4. 高濃度高氯酸

儲(chǔ)存條件  

收到試劑盒后，將10倍檢測緩沖液和中和緩沖液在室溫下保存。將丙酮酸激酶和丙酮酸氧化酶儲(chǔ)存在-80℃。將其他所有組分儲(chǔ)存在-20℃。熒光探針對光敏感，必須妥善保存。避免多次凍融循環(huán)。

結(jié)果示例  

以下圖表展示了ADP檢測試劑盒的典型結(jié)果。以下數(shù)據(jù)僅供參考，不應(yīng)用于解釋或計(jì)算實(shí)際樣本結(jié)果。

文獻(xiàn)參考：

1. Knowles J R (1980) Annu. Rev. Biochem. 49: 877–919.

2. Votyakova TV, and Reynolds IJ (2001) Neurochem. 79:266.

3. T?rnroth-Horsefield S and Neutze R. (2008). Proc Natl Acad Sci USA. 105:19565–19566.

4. Nichols CG, Shyng SL, Nestorowicz A, Glaser B, Clement JP, Gonzalez G, Aguilar-Bryan L,Permutt MA, and Bryan J. (1996) Science. 272:1785-1787.

5. Murugappa S, and Kunapuli SP (2006). Front. Biosci. 11: 1977–1986.

Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈（San Diego），是有名的細(xì)胞學(xué)試劑品牌，作為前沿的細(xì)胞學(xué)分析檢測試劑盒生產(chǎn)商，為生物技術(shù)和研究類客戶提供好的基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的高端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。