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sdAb抗mScarlet-i是一種自主研發(fā)的單域抗體(sdAb),能夠以高親和力和特異性識(shí)別mScarlet變體(包括-i、H和3)。
mScarlet背景與特性
mScarlet是通過體外合成多種紅色熒光蛋白的共識(shí)模板創(chuàng)建的(參考文獻(xiàn))。它是目前已知最亮的(大約比mCherry亮3倍)且真正的單體熒光蛋白之一,非常適合用于細(xì)胞成像(FPbase)。mScarlet通常有兩種不同的版本,每個(gè)版本都帶有一個(gè)獨(dú)特的單氨基酸替換:mScarlet-I(T74I),其成熟速度更快;mScarlet-H(M164H),其光穩(wěn)定性更高。目前可獲得的最新變體可以在開源的熒光蛋白數(shù)據(jù)庫“fpbase”中找到。
NanoTag的納米抗體特異性且強(qiáng)烈地結(jié)合多種mScarlet變體(已驗(yàn)證包括mScarlet-I、mScarlet-H和mScarlet-3)。
貨號(hào):N1305-BIOTIN
克隆:2B12
宿主:羊駝
生產(chǎn)于:大腸桿菌
應(yīng)用:免疫熒光(IF)
使用注意事項(xiàng):本品不推薦用于Western blot檢測蛋白,因?yàn)閟dAb主要識(shí)別天然/折疊蛋白。
抗原:mScarlet-i
靶標(biāo):mScarlet-i、mCherry
特異性:在天然構(gòu)象下識(shí)別mScarlet-i和mScarlet-3。與一些mRFP衍生的紅色熒光蛋白(如mCherry)發(fā)生交叉反應(yīng)。
配方:DBCO和生物素偶聯(lián)的sdAb(C端1:1標(biāo)記)是從pH 7.4的PBS中凍干的。
未偶聯(lián)的sdAb是從5 mM KPi pH 6.0、300 mM NaCl、0.5 mM EDTA pH 6.0中凍干的。
HRP偶聯(lián)的sdAb是從HRP保護(hù)緩沖液中凍干的,應(yīng)使用200 uL純水復(fù)溶后在4°C下保存,或使用200 uL高純度無菌50%甘油復(fù)溶后在-80°C下保存。
復(fù)溶:
用250 uL純?nèi)ルx子水復(fù)溶后立即使用。
用250 uL無菌50%甘油復(fù)溶后在-80°C下保存。
運(yùn)輸:常溫
儲(chǔ)存:含有凍干試劑的安瓿可在2-8°C下保存長達(dá)12個(gè)月。復(fù)溶后,在-80°C下保存長達(dá)6個(gè)月。工作分裝可在-20°C下保存長達(dá)4周。
注意事項(xiàng):僅用于體外/研究目的。無毒、無害、無傳染性。
示例應(yīng)用:

A. 用4%多聚甲醛固定的COS7細(xì)胞表達(dá)TOM70-nfScarlet融合蛋白(nf:非熒光)的灰度圖像,使用FluoTag-X2抗mScarlet-i與Atto 488偶聯(lián)(產(chǎn)品編號(hào)N1302-At488,稀釋比例1:500)進(jìn)行染色。
B. A圖的假彩色表示,顯示為綠色(根據(jù)所用熒光團(tuán)的激發(fā)波長進(jìn)行著色)。
C. 所描繪部分的相應(yīng)DAPI信號(hào)。
D. A和C的合并圖像。A的假彩色表示為綠色,C為藍(lán)色。
文獻(xiàn)參考:
Masullo LA, Kowalewski R, Honsa M, et al. Spatial and stoichiometric in situ analysis of biomolecular oligomerization at single-protein resolution. Nat Commun. 2025;16(1):4202. Published 2025 May 6. doi:10.1038/s41467-025-59500-z (ICC/IF; DNA-PAINT; Exchange-PAINT; CHO cells)
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