NanoTag內(nèi)部開發(fā)的單域抗體（sdAb），能夠以低皮摩爾（pM）親和力識別小型、合理設(shè)計的ALFA標簽（SRLEEELRRRLTE）。

ALFA標簽是一種新型的、合理設(shè)計的表位標簽（SRLEEELRRRLTE），屬于NanoTag專有技術(shù)的一部分。與大多數(shù)傳統(tǒng)表位標簽不同，ALFA標簽是基于合理考慮開發(fā)的，這使NanoTag能夠為其配備所需的特性。ALFA標簽與三種單域抗體（sdAb）結(jié)合，為在幾乎所有生化和生物醫(yī)學應用中使用單一表位標簽提供了一個獨特的平臺。該系統(tǒng)的完整特性描述可以在2019年發(fā)表于《自然·通訊》的一篇開源文章中找到。

這種單域抗體（sdAb，N1505）是克隆1G5，它是ALFA系統(tǒng)家族中對ALFA標簽親和力最強的成員（約26皮摩爾）。它也是NanoTag在FluoTag?-X2抗ALFA（N1502）、重組抗ALFA抗體（rHcAb；N1582-N1586）、抗ALFA雙特異性抗體（N1590-N1592）、sdAb抗ALFA Halo融合蛋白（N1541）以及ALFA選擇器ST（N1511）中使用的同一種克隆。

艾美捷ALFA選擇器PE（包括ALFA肽N1520-10mg）：

貨號：N1505-BIOTIN

克隆號：1G5

宿主：羊駝

生產(chǎn)來源：大腸桿菌

應用：免疫熒光（IF）、西方印跡（WB）

稀釋比例：與抗ALFA sdAb HRP進行的ELISA實驗中，稀釋比例為1:5000

靶標：ALFA標簽

特異性：識別ALFA標簽（SRLEEELRRRLTE）。

配方：帶有DBCO和生物素的sdAb（C端1:1標記）是從pH 7.4的PBS中凍干的。未偶聯(lián)的sdAb是從5 mM KPi pH 6.0、300 mM NaCl、0.5 mM EDTA pH 6.0中凍干的。用250 L純?nèi)ルx子水復溶后可立即使用，或用250 L無菌50%甘油復溶后在-80°C下保存。

與HRP偶聯(lián)的sdAb是從HRP保護緩沖液中凍干的，應使用200 L純?nèi)ルx子水復溶后在4°C下保存，或使用200 L高純度、無菌的50%甘油復溶后在-80°C下保存。

分子量（kDa）：16.0

消光系數(shù)：18638

運輸：常溫

儲存：含有凍干試劑的安瓿可在2-8°C下保存長達12個月。復溶后，可在-80°C下保存長達6個月。工作分裝可在-20°C下保存長達4周。

注意：僅供體外/研究使用。無毒、無害、無傳染性。

用抗ALFA sdAb（編號N1505-DBCO，稀釋比例1:500）對表達ALFA - 波形蛋白融合蛋白的HeLa細胞進行免疫染色，該sdAb帶有10個核苷酸的單鏈DNA，通過3D DNA - PAINT成像。直方圖指的是由小黃矩形標記的區(qū)域，在該區(qū)域中，雖然兩個單獨的波形蛋白絲僅相距約90納米，但它們?nèi)员唤馕龀鰜怼６ㄎ痪葹?.2納米。圖修改自Gotzke等人，《自然·通訊》2019年。

文獻參考：

Kalogriopoulos NA, Tei R, Yan Y, et al. Synthetic GPCRs for programmable sensing and control of cell behaviour. Nature. Published online December 4, 2024. doi:10.1038/s41586-024-08282-3 (N1505-Biotin; magnetic-activated cell sorting MACS; primary human T cells)

Mougios N, Cotroneo ER, Imse N, et al. NanoPlex: a universal strategy for fluorescence microscopy multiplexing using nanobodies with erasable signals. Nat Commun. 2024;15(1):8771. Published 2024 Oct 10. doi:10.1038/s41467-024-53030-w

Shaib AH, Chouaib AA, Chowdhury R, et al. One-step nanoscale expansion microscopy reveals individual protein shapes. Nat Biotechnol. Published online October 9, 2024. doi:10.1038/s41587-024-02431-9