FluoTag-X2抗ALFA是一種熒光標(biāo)記的單域抗體（sdAb），能夠特異性地檢測小型、合理設(shè)計(jì)的ALFA標(biāo)簽。它能夠直接且高度特異性地?zé)晒鈾z測ALFA標(biāo)記的目標(biāo)，無需使用二抗。

FluoTag-X2抗ALFA基于NanoTag內(nèi)部開發(fā)的一種單域抗體（sdAb），能夠特異性識(shí)別小型、合理設(shè)計(jì)的表位標(biāo)簽ALFA，其解離常數(shù)約為26皮摩爾。該系統(tǒng)的完整特性描述可以在2019年發(fā)表于《自然·通訊》的一篇開源文章中找到。

無論樣本是活體還是使用4%多聚甲醛、2%戊二醛或甲醇固定的，F(xiàn)luoTag-X2抗ALFA都能以單價(jià)高親和力和特異性結(jié)合。像所有FluoTag-X2試劑一樣，每個(gè)單域抗體（sdAb）上都特異性地結(jié)合了兩個(gè)熒光團(tuán)。

由于NanoTag的FluoTags體積小，ALFA標(biāo)簽也短（15個(gè)氨基酸；PSRLEEELRRRLTEP），目標(biāo)表位與每個(gè)熒光團(tuán)之間的距離小于3納米。感興趣的蛋白質(zhì)可以在N端、C端或域間使用NanoTag的ALFA標(biāo)簽進(jìn)行標(biāo)記。ALFA標(biāo)記的目標(biāo)蛋白也可以使用NanoTag具有生理洗脫能力的ALFA選擇器樹脂系列與復(fù)合物或伴侶結(jié)合物進(jìn)行免疫沉淀或原生純化。

因此，這種ALFA標(biāo)簽以及配套的FluoTags-X2抗ALFA和ALFA選擇器樹脂是完美選擇，適用于想要與生化純化、質(zhì)譜分析或任何其他高端應(yīng)用相結(jié)合的基于熒光的實(shí)驗(yàn)。

FluoTags可以配備單個(gè)熒光團(tuán)以實(shí)現(xiàn)更定量的讀數(shù)（FluoTag-Q），每個(gè)單域抗體配備兩個(gè)熒光團(tuán)（FluoTag-X2）。

艾美捷FluoTag-X2抗ALFA AbberiorStar635P：

貨號(hào)：N1502-AB635P-L

克隆號(hào)：1G5

宿主：羊駝

生產(chǎn)來源：大腸桿菌

應(yīng)用：免疫熒光（IF）、免疫組化（IHC）、西方印跡（WB）

稀釋比例：1:500（相當(dāng)于最終濃度5納摩爾）

靶標(biāo)：ALFA標(biāo)簽

特異性：它識(shí)別ALFA標(biāo)簽（SRLEEELRRRLTE）。

配方：單個(gè)sdAb克隆從含有2% BSA（美國來源）的pH 7.4的PBS中凍干。

運(yùn)輸：常溫

儲(chǔ)存：含有凍干試劑的安瓿可在2-8°C下保存長達(dá)12個(gè)月。復(fù)溶后，可在-80°C下保存長達(dá)6個(gè)月。工作分裝可在-20°C下保存長達(dá)4周。

注意：僅供體外/研究使用。無毒、無害、無傳染性。

使用FluoTag-X2 Sufo Cyanin 3抗ALFA sdAb（編號(hào)N1502，稀釋比例1:1000；紅色）對(duì)表達(dá)ALFA標(biāo)簽融合蛋白的PFA固定腦切片進(jìn)行免疫染色。細(xì)胞核用DAPI（藍(lán)色）可視化。

文獻(xiàn)參考：

1、G?tzke H, Kilisch M, Martínez-Carranza M, Sograte-Idrissi S, Rajavel A, Schlichthaerle T, Engels N, Jungmann R, Stenmark P, Opazo F, Frey S. The ALFA-tag is a highly versatile tool for nanobody-based bioscience applications. Nat Commun. 2019 Sep 27;10(1):4403. doi: 10.1038/s41467-019-12301-7. PMID: 31562305; PMCID: PMC6764986.

2、Reinders NR, van der Spek SJF, Klaassen RV, et al. Amyloid-β-Driven Synaptic Deficits Are Mediated by Synaptic Removal of GluA3-Containing AMPA Receptors. J Neurosci. 2025;45(9):e0393242024. Published 2025 Feb 26. doi:10.1523/JNEUROSCI.0393-24.2024  (N1502-AF647-L; IF; rat hippocampal neurons)

3、Hodel AW, Rudd-Schmidt JA, Noori T, et al. Acidic pH can attenuate immune killing through inactivation of perforin. EMBO Rep. Published online January 9, 2025. doi:10.1038/s44319-024-00365-6 (N1502-AF568-L; IF of ALFA-PRF release in artificial immune synapses)