ALFA肽樹脂是一種高親和力樹脂，可用于高效、純凈地純化與NbALFA（單域抗體抗ALFA）融合的蛋白質(zhì)。該樹脂采用共價(jià)固定在4%瓊脂糖或磁性瓊脂糖微珠上的ALFA樣肽段設(shè)計(jì)而成。

ALFA系統(tǒng)基于ALFA標(biāo)簽（一種高度通用的表位標(biāo)簽，其核心序列為SRLEEELRRRLTE）及其高親和力結(jié)合伴侶NbALFA（單域抗體抗ALFA）。NbALFA是一種單域抗體（sdAb），解離常數(shù)約為26 pM。

ALFA肽樹脂是專為選擇性純化與NbALFA融合的蛋白質(zhì)而設(shè)計(jì)的親和樹脂。該樹脂提供兩種形式：基于4%交聯(lián)瓊脂糖或磁性瓊脂糖。兩種形式均采用固定的ALFA樣肽段，能夠高效、高特異性地捕獲NbALFA及NbALFA標(biāo)記的目的蛋白（POI）。洗脫在溫和酸性條件（pH 3.0）下進(jìn)行，通常可避免使用 harsh 變性劑或還原劑，從而保留敏感蛋白質(zhì)的天然構(gòu)象和功能。這使得ALFA肽樹脂特別適用于需要功能完整、結(jié)構(gòu)完整的蛋白質(zhì)的應(yīng)用。

兩種ALFA肽樹脂變體在結(jié)合和洗滌過程中與多種緩沖液配方兼容，并可耐受高濃度的常見去污劑和還原劑（詳見實(shí)驗(yàn)方案），為定制化純化流程提供了靈活性。由于ALFA樣肽段通過共價(jià)連接，該樹脂可承受多次再生循環(huán)和 harsh 的原位清洗（CIP）程序，而不會(huì)顯著降低性能。

艾美捷ALFA肽樹脂：

貨號(hào)：N1530

生產(chǎn)來源：合成肽

應(yīng)用：免疫沉淀（IP）

結(jié)合容量：結(jié)合容量取決于目標(biāo)蛋白的流體動(dòng)力學(xué)特性。例如：對(duì)NbALFA（14 kDa）的結(jié)合容量約為500 ?M（約7 mg/mL）；對(duì)NbALFA–Halo融合蛋白（48 kDa）的結(jié)合容量約為400 ?M（約19 mg/mL）。

靶點(diǎn)：NbALFA

特異性：與NbALFA（單域抗體抗ALFA）特異性結(jié)合

制劑：50%漿液（PBS中含20%乙醇）

運(yùn)輸條件：環(huán)境溫度

儲(chǔ)存條件：4°C保存，有效期12個(gè)月。請(qǐng)勿冷凍！

注意：僅限體外研究使用。無毒、無危險(xiǎn)、無傳染性。

使用ALFA肽樹脂（貨號(hào)N1530）對(duì)NbALFA（單域抗體抗ALFA）進(jìn)行親和純化的示例：將2.5 μM NbALFA加入大腸桿菌裂解液后，在室溫下兩次過柱0.5 mL ALFA肽樹脂。結(jié)合后，用PBS洗滌樹脂，并分別在單獨(dú)實(shí)驗(yàn)中用pH 2.2（A）、pH 3.0（B）或pH 5.0（C）的檸檬酸鈉緩沖液以五個(gè)柱體積進(jìn)行流動(dòng)洗脫。剩余結(jié)合蛋白用SDS樣品緩沖液洗脫。通過SDS-PAGE和考馬斯亮藍(lán)染色對(duì)指定餾分進(jìn)行分析。pH 5.0洗餾分作為陰性對(duì)照。