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一種能夠識別mNeonGreen(mNG)的單域抗體(sdAb),mNeonGreen是一種源自文昌魚(Branchiostoma lanceolatum)的明亮的單體綠色熒光蛋白。
mNeonGreen是一種非常明亮的單體綠色熒光蛋白,當作為細胞中的熒光探針表達時,它相對成熟得較快。正因為如此,自2013年被發(fā)現(xiàn)以來,mNeonGreen在生物科學領域受到了廣泛關注。它是從文昌魚中發(fā)現(xiàn)的野生型蛋白衍生出來的合成版本。
目前可用的最新變體可以在熒光蛋白數(shù)據(jù)庫“fpbase”中找到開源數(shù)據(jù)庫。
貨號:N3205-BIOTIN
克隆號:1E2
宿主:羊駝
生產(chǎn):大腸桿菌
應用:
免疫熒光(ICC)
免疫組化(IHC)
注意:不推薦用于Western blot檢測蛋白,因為sdAbs主要識別天然/折疊蛋白。
靶標:mNeonGreen
特異性:識別mNeonGreen。不與任何GFP、dsRed或TagBFP衍生物發(fā)生交叉反應。
配方:
DBCO和生物素偶聯(lián)的sdAb(C末端1:1標記)從pH 7.4的PBS中凍干。未偶聯(lián)的sdAb從5 mM KPi pH 6.0、300 mM NaCl、0.5 mM EDTA pH 6.0中凍干。用250 ?L純?nèi)ルx子水復溶后可立即使用,或用250 ?L無菌50%甘油復溶后在-80°C下保存。
kDa:16.8
消光系數(shù):35598
運輸:常溫
儲存:含有凍干試劑的安瓿可在2-8°C下保存長達12個月。復溶后,在-80°C下保存長達6個月。工作分裝液可在-20°C下保存長達4周。
注意事項:僅用于體外/研究。無毒、無危害、無傳染性。
實驗示例:

用FluoTag-X2抗mNeonGreen(sdAb抗mNeonGreen與熒光團偶聯(lián))對表達TOM70-mNeonGreen融合蛋白的PFA固定Cos7細胞進行免疫染色。FluoTag信號以綠色表示,DAPI染色的細胞核以藍色顯示。
文獻參考:
Deutz LN, Sar?kaya S, Dickinson DJ. Membrane extraction in native lipid nanodiscs reveals dynamic regulation of Cdc42 complexes during cell polarization. Biophys J. Published online November 23, 2023. doi:10.1016/j.bpj.2023.11.021 (N3205-Biotin; Table S1; Microfluidic devices/coverslips coating for TIRF microscopy)
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