抗Halo標(biāo)簽單域抗體 (sdAb anti-Halo) 是一種內(nèi)部研發(fā)的單域抗體（sdAb），可特異性結(jié)合HaloTag。它能夠?qū)崿F(xiàn)Halo標(biāo)簽融合蛋白的高特異性檢測，并且通常與Halo配體同時(shí)結(jié)合兼容。

HaloTag(1)技術(shù)是分子和細(xì)胞生物學(xué)中廣泛使用且高度通用的平臺，可用于詳細(xì)分析蛋白質(zhì)功能、動力學(xué)和分子相互作用。該技術(shù)基于一種經(jīng)基因工程改造的細(xì)菌鹵代烷脫鹵酶，其被修飾后可與合成的Halo配體形成特異且穩(wěn)定的共價(jià)鍵。這些配體可被多種功能基團(tuán)修飾，包括熒光團(tuán)、生物素和親和標(biāo)簽，從而在活細(xì)胞成像、蛋白質(zhì)純化和生化分析中實(shí)現(xiàn)多樣化應(yīng)用。

與傳統(tǒng)的Halo配體不同，抗Halo單域抗體（克隆1A12）識別HaloTag表面暴露的表位，并且通常與Halo配體同時(shí)結(jié)合兼容，因此在多重應(yīng)用中保持HaloTag系統(tǒng)的功能完整性。

艾美捷抗Halo標(biāo)簽蛋白單域抗體：

貨號：N5005-Biotin

克隆號：1A12

宿主：羊駝

生產(chǎn)系統(tǒng)：大腸桿菌

應(yīng)用：ELISA、免疫熒光（IF）

抗原：HaloTag

靶點(diǎn)：HaloTag

特異性：特異性識別HaloTag，未發(fā)現(xiàn)與其他蛋白質(zhì)的交叉反應(yīng)。

制劑：DBCO和生物素偶聯(lián)的sdAb（C端1:1標(biāo)記）從PBS pH 7.4中凍干。未偶聯(lián)的sdAb從10 mM KPi、150 mM NaCl、1 mM EDTA pH 6.0中凍干。使用250 uL純水復(fù)溶后立即使用，或用250 uL 50%甘油復(fù)溶后于-80°C儲存。

分子量：14.9 kDa

消光系數(shù)：20128

運(yùn)輸條件：常溫

存儲條件：含凍干試劑的西林瓶可在2-8°C下保存12個(gè)月。復(fù)溶后，可在-80°C下保存6個(gè)月。工作 aliquots 可在-20°C下保存4周。

注意：僅限體外/研究使用。無毒、無危害性、無傳染性。

通過生物層干涉技術(shù)（BLI）使用鏈霉親和素生物傳感器，對固定化的抗Halo單域抗體克隆1A12（生物素化，5μg/mL）與Halo標(biāo)簽分析物（20-0.3125 nM）之間的相互作用進(jìn)行動力學(xué)分析。結(jié)合和解離階段（彩色軌跡）采用1:1結(jié)合模型進(jìn)行全局?jǐn)M合（黑線）。所得動力學(xué)參數(shù)顯示其具有高親和力結(jié)合特性：結(jié)合速率常數(shù)kon=(2.96±0.17)×10? M??s??，解離速率常數(shù)koff=(5.21±0.01)×10?? s??，對應(yīng)的平衡解離常數(shù)KD=176.9±0.2 pM。

參考文獻(xiàn)：

Los GV, Encell LP, McDougall MG, et al. HaloTag: a novel protein labeling technology for cell imaging and protein analysis. ACS Chem Biol. 2008;3(6):373-382. doi:10.1021/cb800025k