精氨酸組蛋白甲基化是眾多重要的表觀遺傳標(biāo)記之一，對于多種細胞過程的調(diào)控至關(guān)重要。組蛋白H3（精氨酸2、17、26）和H4（精氨酸3）的精氨酸甲基化能夠促進轉(zhuǎn)錄激活，這一過程由蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶（PRMTs）家族介導(dǎo)。人類中有9種PRMTs，但只有7種被報道能夠甲基化組蛋白。這些酶可以介導(dǎo)精氨酸殘基的單甲基化或二甲基化。它們以S-腺苷-L-蛋氨酸（SAM）作為甲基供體，將其轉(zhuǎn)移到精氨酸的胍基側(cè)鏈上。根據(jù)甲基添加的位置，PRMTs可以分為I型（PRMT1、PRMT2、PRMT3、CARM1/PRMT4、PRMT6和PRMT8）和II型（PRMT5和PRMT9）。

Epigenase I型PRMT甲基轉(zhuǎn)移酶活性/抑制檢測試劑盒（比色法）是一套完整的必需組件，用于測量來自多種物種（包括哺乳動物、植物、真菌和細菌）的核提取物或純化酶（如PRMT1至PRMT4）的總I型PRMT活性或抑制情況，適用于多種形式的樣本，包括培養(yǎng)細胞和新鮮組織。

艾美捷Epigentek-表基因酶I型PRMT甲基轉(zhuǎn)移酶活性/抑制測定試劑盒（比色法）（#P-3098-48）具有以下優(yōu)勢：

3小時比色法流程：采用96孔條板微孔板格式，可手動或高通量分析。

直接檢測I型PRMT活性：通過簡單檢測PRMT轉(zhuǎn)化的甲基化產(chǎn)物來直接測量I型PRMT活性。

適用于細胞/組織提取物和純化I型PRMT：既可以使用細胞/組織提取物，也可以使用純化的I型PRMT，從而能夠在體內(nèi)和體外檢測I型PRMT抑制劑的抑制效果。

靈敏度高：檢測限低至10 ng純化的PRMT6酶。

包含甲基化H4-Arg3標(biāo)準品：可用于定量I型PRMT的比活性。

準確、可靠且一致性高：背景信號極低。

原理與流程：

在此實驗中，I型PRMT底物被穩(wěn)定地涂覆在微孔板孔中。活性I型PRMT（如PRMT1-4、PRMT6和PRMT8）能夠結(jié)合底物，并從Adomet轉(zhuǎn)移甲基以甲基化底物。甲基化產(chǎn)物可以被特異性抗體識別。通過在微孔板光譜儀上以450 nm波長讀取吸光度，可以比色法測量與酶活性成正比的甲基化產(chǎn)物的比例或量。I型PRMT酶的活性與測量到的光密度強度成正比。

左圖：I型PRMT活性檢測的靈敏度演示  

通過使用重組PRMT1與Epigenase I型PRMT甲基轉(zhuǎn)移酶活性/抑制檢測試劑盒（比色法）進行實驗，展示了I型PRMT活性檢測的靈敏度。  

右圖：使用I型PRMT檢測標(biāo)準生成的示例標(biāo)準曲線。

起始材料：

輸入材料可以是核提取物或純化的I型酶（如PRMT1至PRMT4）。每個實驗所需的核提取物量為1 ug至20 ug，最佳范圍為5 ug至10 ug。純化酶的用量為10 ng至500 ng，具體取決于酶的純度和催化活性。