Calbiotech-17-羥基孕酮（17-OHP）ELISA試劑盒旨在定量測(cè)定血清中的17-OHP。僅供研究使用。不用于診斷程序。

艾美捷Calbiotech-17-羥基孕酮（17-OHP）ELISA試劑盒（PG338S）檢測(cè)原理：

Calbiotech 17α-OH孕酮（17-OHP）是基于測(cè)試樣本中的17-OHP與17-OHP-HRP之間的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合原理，以獲得恒定量的兔抗17-OHP抗體。在試驗(yàn)中，山羊抗兔IgG包被的孔與25?l 17-OHP標(biāo)準(zhǔn)品、50?l 17-OH HRP偶聯(lián)物和50?l兔抗17-OHP一起孵育。HRP標(biāo)記的17-OHP在標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中與17-OHP競(jìng)爭(zhēng)特定抗17-OHP抗體的固定數(shù)量的結(jié)合位點(diǎn)。因此，隨著樣本中17-OHP濃度的增加，與孔免疫結(jié)合的17-OHP過(guò)氧化物酶偶聯(lián)物的量逐漸減少。然后通過(guò)洗滌步驟去除未結(jié)合的17-OHP。TMB基板被添加，導(dǎo)致藍(lán)色的發(fā)展。加入終止溶液停止顯色，在450nm處分光光度法測(cè)量吸光度。制備了一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，將顏色強(qiáng)度與17-OHP的濃度相關(guān)聯(lián)

Calbiotech-17-羥基孕酮（17-OHP）ELISA試劑盒測(cè)定程序：

1. 將所需數(shù)量的包被條放入支架中。

2. 向相應(yīng)的孔中分發(fā)25微升17-OHP標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品和樣本。

3. 向所有孔中加入50微升工作稀釋N-17-OHP酶結(jié)合物。

4. 向所有孔中加入50微升N-17-OHP抗體試劑。

5. 輕輕搖動(dòng)微孔板20-30秒以混合。

6. 在室溫下孵育60分鐘。

7. 迅速搖動(dòng)以清除孔中的內(nèi)容物。用1X洗滌緩沖液洗孔3次。在吸水紙上猛擊孔以去除殘留的水滴。

8. 向每個(gè)孔中加入100微升TMB底物。

9. 覆蓋微孔板，并在室溫下孵育15分鐘。

10. 向每個(gè)孔中加入50微升終止溶液，并輕輕混合，直到每個(gè)孔中獲得均勻的顏色。

11. 在加入終止溶液后的15分鐘內(nèi)，讀取每個(gè)孔的吸光度，波長(zhǎng)為450nm。

結(jié)果計(jì)算：

標(biāo)準(zhǔn)曲線的構(gòu)建如下：

1. 計(jì)算每組標(biāo)準(zhǔn)品和患者樣本的平均吸光度值。

2. 為了構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，將每個(gè)17-OHP標(biāo)準(zhǔn)品的平均吸光度（垂直軸）與其濃度（ng/ml，水平軸）作圖。

3. 通過(guò)已繪制的點(diǎn)繪制最佳擬合曲線。

4. 從曲線上讀取每個(gè)未知樣本的吸光度，以確定17-OHP的相應(yīng)濃度。

艾美捷科技是Calbiotech的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。