PKMITO 系列的Red、Orange及Deep Red具有非常低的化學毒性、光學毒性和優(yōu)秀的線粒體定位能力。綜合這些優(yōu)異的性能,PKMITO 系列產品非常適合用于線粒體成像,尤其在SIM和STED等超分辨成像和細胞分選等領域。除此之外,PKMITO? 系列產品也已經在斑馬魚等小動物實驗中用于線粒體成像。  

目前Genvivo證明了該探針與常規(guī)免疫標記和其他常用的固定樣品熒光標記策略的兼容性。此外，我們發(fā)現(xiàn)PKMO FX促進了相關的超分辨率光學和電子顯微鏡，使多色熒光圖像和透射電鏡圖像通過線粒體模式的相關性。我們的探針進一步擴展了線粒體工具包，用于納米分辨率的多模態(tài)顯微鏡。  

艾美捷Genvivo可固定線粒體超分辨探針（#PKMOF-1）可參考以下步驟：

1.在 PK Mito Red/ Orange/ Deep Red 中加入 100 μL（25 nmol）/ 20μL（5 nmol）新鮮干燥的 DMSO，混合均勻，得到 250 μM 母液。

2.將培養(yǎng)基預熱至 37 ℃，將 PK Mito Red/ Orange/ Deep Red 母液按照1000- 5000倍稀釋比例加入到預熱的培養(yǎng)基中，稀釋后的染液建議盡快使用，久置后可能導致部分染料分解或沉淀。

3.吸去細胞原有的培養(yǎng)基，更換為稀釋好的培養(yǎng)基染液，在培養(yǎng)箱中孵育15 分鐘。

4.用預熱的培養(yǎng)基清洗細胞一至兩次，即可用于熒光成像。

注：我們建議對大多數(shù)細胞系和原代細胞使用 200-300 nM，如HeLa、COS7、U-2OS、Vero細胞、原代神經元、脂肪細胞和肝細胞；對組織染色使用500-600 nM。不同樣品染色條件有所差異，建議起始染色方法為 1000 倍稀釋，15 分鐘染色，請根據(jù)實際染色效果進行調整。

目前PKMITO 系列主要供應3款不同顏色的探針：

可固定線粒體超分辨探針文獻參考：

1. Yang, Zhongtian, et al. "Cyclooctatetraene-conjugated cyanine mitochondrial probes minimizephototoxicity in fluorescence and nanoscopic imaging." Chemical Science (2020).

2. Liu, Tianyan, et al. "Multi-color live-cell STED nanoscopy of mitochondria with a gentleinnermembrane stain." Proceedings of the National Academy of Sciences 119.52 (2022): e2215799119.

3. Chen, Jingting, et al. "An aldehyde-crosslinking mitochondrial probe for STED imaging infixedcells."Proceedings of the National Academy of Sciences 121.19 (2024): e2317703121.