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化學固定標本的熒光標記技術(shù),尤其是免疫標記技術(shù),在超分辨率成像中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,它為線粒體等細胞結(jié)構(gòu)或生物分子的分布提供了一種方便、精細的方法。
一種線粒體探針的開發(fā),既具有光學優(yōu)勢,又能在固定后保持強熒光信號,這將進一步使線粒體研究的超分辨率成像技術(shù)大眾化。
Genvivo有一種新興的生物偶聯(lián)策略來開發(fā)可醛固定的線粒體探針PK Mito Orange FX (PKMO FX),它可以在固定前后進行納米級STED成像。盡管各個供應商開發(fā)了各種不同的探針,可以對活細胞中的線粒體進行超分辨受激發(fā)射耗盡(STED)成像,但大多數(shù)這些膜電位依賴性熒光團在化學固定后不能很好地保留在線粒體中。缺乏合適的線粒體探針限制了線粒體對活細胞樣本的STED成像。Genvivo引入了一種線粒體特異性探針PK Mito Orange FX (PKMO FX),它具有固定驅(qū)動的交聯(lián)基序,并在線粒體內(nèi)膜中積累。它在化學固定后具有高熒光保留率,在775 nm處有效耗盡,可以在醛固定前后進行納米級成像。
目前Genvivo證明了該探針與常規(guī)免疫標記和其他常用的固定樣品熒光標記策略的兼容性。此外,我們發(fā)現(xiàn)PKMO FX促進了相關(guān)的超分辨率光學和電子顯微鏡,使多色熒光圖像和透射電鏡圖像通過線粒體模式的相關(guān)性。我們的探針進一步擴展了線粒體工具包,用于納米分辨率的多模態(tài)顯微鏡。
艾美捷Genvivo可固定線粒體超分辨探針成像結(jié)果賞析:

目前PKMITO系列主要供應3款不同顏色的探針:
產(chǎn)品名稱 貨號 包裝 適用范圍
PK Mito Red PKMR-1 25nmol 熒光顯微鏡、Confocal、SIM
PK Mito Orange PKMO-1 25nmol 熒光顯微鏡、Confocal、SIM、STED
PK Mito Deep Red PKMDR-1 25nmol 熒光顯微鏡、Confocal、SIM
PK Mito Orange Fix PKMOF 10次/50次 熒光顯微鏡、Confocal、SIM、STED
保存條件:-20℃,避光
可固定線粒體超分辨探針文獻參考:
Chen, Jingting, et al. "An aldehyde-crosslinking mitochondrial probe for STED imaging in fixed cells." Proceedings of the National Academy of Sciences 121.19 (2024): e2317703121.
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