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酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)原理:
本檢測基于夾心ELISA技術(shù),其中針對組裝好的AAV衣殼上的構(gòu)象表位的單克隆抗體(mAb)被包被在板上,并用于從樣本中捕獲AAV顆粒。
捕獲的AAV顆粒的檢測是一個(gè)兩步過程。
生物素結(jié)合的單克隆抗體與捕獲的AAV顆粒結(jié)合。
鏈霉親和素過氧化物酶結(jié)合物與生物素分子反應(yīng)。底物的添加導(dǎo)致顏色反應(yīng),該反應(yīng)與特異性結(jié)合的病毒顆粒的數(shù)量成正比。
AAV定量方法比較:
每種常用的定量方法都有其優(yōu)缺點(diǎn):
qPCR被廣泛使用,但存在一些問題,如樣本準(zhǔn)備、引物設(shè)計(jì)或PCR效率,這些問題可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果的高變異性。
數(shù)字滴液PCR方法克服了qPCR的一些限制。然而,由于不同的樣本處理協(xié)議,實(shí)驗(yàn)室之間仍然可能出現(xiàn)變異。
點(diǎn)印跡是一種簡單且定量的方法,如果使用可靠的參考材料。然而,它受到一般西方印跡的線性和動(dòng)態(tài)范圍的限制。
鑒于上述技術(shù)的實(shí)用缺陷,傳統(tǒng)的夾心ELISA目前在實(shí)驗(yàn)室間和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變異性以及易用性方面似乎更為優(yōu)越。因此,它代表了可靠和可重復(fù)的總rAAV衣殼滴度定量的z佳格式。

艾美捷PROGEN-AAV1 Titration ELISA:
貨號:PRAAV1
規(guī)格:96次測試
反應(yīng)性:AAV1(腺相關(guān)病毒1型)
儲(chǔ)存條件:2-8°C
用途:僅限研究使用
應(yīng)用:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)
產(chǎn)品描述:一種獨(dú)特的微孔板酶免疫測定法,用于定量檢測AAV1的病毒粒子和組裝好的空衣殼。捕獲抗體能夠檢測到未組裝衣殼蛋白上不存在的構(gòu)象表位。
試劑盒控制/標(biāo)準(zhǔn):AAV1空衣殼的制備
供應(yīng)形式:試劑盒,12個(gè)8孔條狀試劑。
PROGEN-混洗/突變AAV的使用:
洗牌/突變AAV載體的識別能力取決于受洗牌/突變影響的特定衣殼區(qū)域。PROGEN的AAV ELISA使用的捕獲抗體結(jié)合特定的,某些情況下定義明確的構(gòu)象表位。這些表位是由相應(yīng)AAV血清型的衣殼組裝產(chǎn)生的。ELISA可能識別您的洗牌/突變AAV載體的第一個(gè)跡象是抗體結(jié)合表位的存在。然而,衣殼蛋白序列的變化也可能影響蛋白質(zhì)的構(gòu)象,因此也影響AAV衣殼上呈現(xiàn)的表位的構(gòu)象。這可能會(huì)影響抗體的結(jié)合親和力,并根據(jù)AAV ELISA試劑盒提供的(非洗牌)試劑盒控制來影響滴度的測定。由于這些屬性強(qiáng)烈依賴于特定的洗牌/突變操作,PROGEN不能保證成功且精確地定量您的洗牌/突變AAV載體。即使抗體結(jié)合表位仍然存在于您的洗牌/突變AAV衣殼上,您的檢測也需要針對您的特定AAV載體進(jìn)行測試和優(yōu)化。
PROGEN強(qiáng)烈建議生產(chǎn)和校準(zhǔn)一個(gè)合適的(洗牌/突變的)試劑盒控制,以確保使用PROGEN ELISA試劑盒對您的個(gè)別洗牌/突變AAV載體進(jìn)行可靠的滴度測定。
PROGEN-AAV1 Titration ELISA的關(guān)鍵特性:
ELISA用于定量檢測AAV1衣殼:一種酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),用于測定AAV1衣殼的數(shù)量。
檢測完整和空的AAV1衣殼:能夠檢測到完整和空的AAV1病毒衣殼。
ADK1a抗體用作捕獲和檢測抗體:ADK1a抗體被用作ELISA中的捕獲抗體和檢測抗體。
艾美捷科技是PROGEN的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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