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PROGEN的AAV衣殼蛋白抗體識別病毒衣殼蛋白VP1、VP2和VP3的線性表位。AAV衣殼蛋白的高度序列相似性使得跨血清型的蛋白質易于檢測。

圖1顯示了三種衣殼蛋白和相應的抗體結合位點。由于所有VP蛋白都由相同的閱讀框編碼,由于使用了交替的起始密碼子和交替的剪接,它們僅在N端區(qū)域不同。結合C末端部分的抗體,如B1,能夠結合所有衣殼蛋白,而像A1這樣的抗體只能結合VP1,A69只能與VP1和VP2結合。
衣殼蛋白抗體可用于蛋白質印跡分析,以檢測VP1、VP2和VP3的表達水平,以及使用色譜、免疫沉淀或免疫熒光進行蛋白質定位研究或蛋白質-蛋白質相互作用。
艾美捷PROGEN-衣殼蛋白抗體結合位點和反應性:
針對AAV2衣殼蛋白在小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的衣殼蛋白抗體,適用于所有檢測變性VP蛋白線性表位的應用,如西方墨點分析(Western blot分析)。
Serotype Antibody Residues* Binding Site
AAV2 A1 123-KRVLEPLGL-131 Binding site is located at the N-terminus of the VP1 protein. Detection of VP1 only.
AAV2 A69 171-LNFGQTGDADSV-182 Binding site is located at the N-terminus of the VP2 protein. Detection of VP1 and VP2.
AAV2 B1 726-IGTRYLTR-733 Binding site is located at the C-terminus common to all three VP proteins. Detection of VP1, VP2 and VP3.
*氨基酸位置與VP1序列有關。
表位作圖實驗(Wobus等人,2000)確定aa123至aa131(N-末端;)是單克隆A1抗體的特異性結合區(qū)。
Wobus,C.E.等人。抗腺相關病毒2型(AAV-2)衣殼的單克隆抗體:參與AAV-2細胞相互作用和AAV-2感染中和的衣殼結構域的表位定位和鑒定。J.Virol。74, 9281–93 (2000).
交叉反應性:
Antibody AAV1 AAV2 AAV3 AAV4 AAV5 AAV6 AAV7 AAV8 AAV9 AAVrh10 AAV11 AAV12 AAVDJ
A1 x x x x x x x x x x x
A69 x na na na x
B1 x x x x x x x x x x
VP51 na x na na x na na na na na na na na
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x-反應性
na-未分析
空場-無反應性
A1
與所有常見血清型AAV1-12的VP1蛋白發(fā)生反應。在免疫沉淀中,偶爾可以看到與非AAV衍生蛋白的反應。
B1
由于來自不同AAV的VP蛋白序列高度相似,B1抗體顯示出與大多數(shù)測試過的AAV血清型的高交叉反應性。
使用AFDyes:
使用AFDye?標記的抗體,您可以在不使用第二抗體的情況下檢測您感興趣的蛋白質。這為您節(jié)省了寶貴的時間,因為您還可以通過使用不同標記的抗體(如AFDye 647和AFDye 488)同時檢測同一樣本中的不同蛋白質。
PROGEN為B1抗體提供兩種不同的AFDye?偶聯(lián)物:AFDye 647和AFDye 488。
Progen提供各種抗體用于鑒別AAV感染的不同階段以及rAAV的組裝分析。艾美捷科技是PROGEN的經(jīng)銷商,為科研工作者提供優(yōu)質的產(chǎn)品與服務。
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