蛋白酶體是真核細(xì)胞內(nèi)的一種大型多催化蛋白酶復(fù)合體。26S蛋白酶體是一個(gè)包含60個(gè)亞基的顆粒，由一個(gè)20S核心和一個(gè)或兩個(gè)19S調(diào)節(jié)顆粒組成。催化核心，即20S蛋白酶體（700 kDa），由兩組七個(gè)β亞基和兩組七個(gè)α亞基組成。β1、β2和β5亞基分別具有半胱氨酸酶樣、胰蛋白酶樣和胰凝乳蛋白酶樣的肽解活性。在真核細(xì)胞中，20S蛋白酶體的組裝需要至少五種組裝分子伴侶的協(xié)助。蛋白酶體對(duì)細(xì)胞蛋白的降解始于多肽鏈上連接泛素鏈。泛素標(biāo)簽被19S顆粒的“蓋子”識(shí)別并結(jié)合，隨后泛素鏈被解離，蛋白質(zhì)展開并隨后轉(zhuǎn)運(yùn)至20S蛋白酶體中。

蛋白酶體活性在細(xì)胞的主要事件中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，包括蛋白質(zhì)質(zhì)量控制、基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA損傷響應(yīng)、衰老、氧化應(yīng)激和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。在過去二十年中，已經(jīng)鑒定出許多針對(duì)特定活性位點(diǎn)的選擇性蛋白酶體抑制劑。最值得注意的是，硼替佐米（Bortezomib）和卡非佐米（Carfilzomib）是經(jīng)FDA批準(zhǔn)用于治療多發(fā)性骨髓瘤的蛋白酶體抑制劑藥物。目前，還有幾種新的蛋白酶體抑制劑正在試驗(yàn)中，用于治療多發(fā)性骨髓瘤和其他惡性腫瘤。

這種純化的20S蛋白酶體制劑可用于體外降解肽段底物和展開的蛋白質(zhì)。蛋白酶體的胰凝乳蛋白酶樣活性可通過使用Suc-LLVY-AMC（產(chǎn)品編號(hào)：PS500）輕松測(cè)量。被活性酶切割后，它會(huì)產(chǎn)生一種具有460 nm發(fā)射波長(zhǎng)的高熒光產(chǎn)物。

艾美捷[干冰]20S蛋白酶體：

貨號(hào)：PS-0020-0050  

物種：人類  

來源：紅細(xì)胞  

標(biāo)簽：無  

分子量：700 kDa  

數(shù)量：50 ug  

濃度：1 mg/mL  

配方：20 mM Tris-HCl，pH 7.2，10%甘油，150 mM KCl，1 mM β-巰基乙醇  

儲(chǔ)存：-80°C，避免反復(fù)凍融。

[干冰]20S蛋白酶體圖片：

左圖：20S蛋白酶體（45 ?g/ml）的胰凝乳蛋白酶樣活性是通過在20 mM HEPES（pH 7.5）、0.5 mM EDTA、0.05% Triton X的溶液中，使用100 uM Suc-LLVY-AMC進(jìn)行測(cè)量的，實(shí)驗(yàn)中加入了或未加入0.035% SDS。  

右圖：20S蛋白酶體（18 ?g/ml）的胰凝乳蛋白酶樣活性是通過在20 mM HEPES（pH 7.5）、0.5 mM EDTA、0.05% Triton X的溶液中，使用100 uM Suc-LLVY-AMC進(jìn)行測(cè)量的，實(shí)驗(yàn)中加入了或未加入0.5 mM MG132（產(chǎn)品編號(hào)：SI9710）。

文獻(xiàn)參考：

1. Kim HM, et al. (2011) Structure characterization of the 26S proteasome. Biochimica Biophysica Acta 1809(2),67 – 79.

2. Golgberg AL (2012) JCB Development of proteasome inhibitors as research tools and cancer drugs. 199(4),583-588.

3. Stadtmueller BM and Hill CP (2011) Proteasome activators. Mol Cell 41(1):8-19.

4. Lasker K et al. (2012) Molecular architecture of the 26S proteasome holocomplex determined by an integrative approach. PNAS 109(5):1380-1387

5. Kisselev AF, et al. (2012) Proteasome inhibitors: an expanding army attacking a unique target. Chemistry &Biology, 19(1):99-115.

6. Kim Y-C and DeMartino GN (2011) C termini of proteasomal ATPases play nonequivalent roles in cellular assembly of mammalian 26 S proteasome. JBC 286(30): 26652–26666.