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串聯(lián)泛素結(jié)合實體(Tandem Ubiquitin Binding Entities,TUBEs)的使用正成為泛素研究中不可或缺的策略。第一代TUBEs能夠以個位數(shù)納摩爾級的解離常數(shù)(Kds)結(jié)合K48和K63連接的四聚泛素鏈,其結(jié)合強(qiáng)度比單體泛素結(jié)合相關(guān)結(jié)構(gòu)域(UBAs)高出約100到1000倍。此外,即使在沒有通常用于抑制此類活性的抑制劑的情況下,TUBEs也能保護(hù)蛋白質(zhì)免受去泛素化酶(DUBs)和蛋白酶體的降解。這使得在不太可能改變細(xì)胞生理的條件下,能夠從細(xì)胞系、組織和器官中高效分離天然多泛素鏈及其附著的蛋白質(zhì)。TUBE1和TUBE2已被證明能夠富集所有類型的多泛素鏈連接,不加區(qū)分,即使對于感興趣蛋白的連接類型未知,這些試劑也適用。K48 TUBE HF是為了增強(qiáng)對K48連接的多泛素鏈(~20納摩爾)的選擇性而開發(fā)的,與其他連接類型(>2微摩爾)相比具有更高的選擇性。它可以單獨使用,也可以與我們的其他TUBE產(chǎn)品(尤其是K63 TUBE和M1(線性)TUBE)聯(lián)合使用,以研究您的底物蛋白中的多泛素鏈連接類型。
艾美捷K48泛素鏈特異性的串聯(lián)結(jié)合實體(高性能),Flag標(biāo)簽偶聯(lián):
貨號:UM-0607-0050
標(biāo)簽:FLAG
分子量:22.9 kDa
物理狀態(tài):液體
規(guī)格:50 ug,250 ug
濃度:可變
儲存:-80℃,避免反復(fù)凍融
應(yīng)用:
從細(xì)胞和組織提取物中通過遠(yuǎn)西方印跡法檢測K48多泛素化蛋白
從細(xì)胞和組織提取物中分離和富集K48多泛素化蛋白
分離K48多泛素化蛋白用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究
優(yōu)勢:
對K48多泛素鏈具有納摩爾級親和力
對K48多泛素鏈的偏好性比其他連接類型高出100倍
TUBEs對多泛素的親和力高于大多數(shù)泛素抗體
避免使用過表達(dá)的表位標(biāo)簽泛素進(jìn)行捕獲
與FLAG 技術(shù)兼容,提供靈活性和特異性

文獻(xiàn)參考:
1. Altun, M., H.B. Kramer, L.I. Willems, J.L. McDermott, C.A. Leach, S.J. Goldenberg, K.G. Kumar, R. Konietzny, R.Fischer, E. Kogan, M.M. Mackeen, J. McGouran, S.V. Khoronenkova, J.L. Parsons, G.L. Dianov, B. Nicholson,and B.M. Kessler, Activity-based chemical proteomics accelerates inhibitor development for deubiquitylating enzymes. Chem Biol, 2011. 18(11): p. 1401-12.
2. Hjerpe, R., F. Aillet, F. Lopitz-Otsoa, V. Lang, P. England, and M.S. Rodriques, Efficient protection and isolation of ubiquitylated proteins using tandem ubiquitin-binding entities. EMBO Rep, 2009. 10: p. 1250-1258.
3. Aillet, F., F. Lopitz-Otsoa, R. Hjerpe, M. Torres-Ramos, V. Lang, and M.S. Rodriguez, Isolation of ubiquitylated proteins using tandem ubiquitin-binding entities. Meth Mol Biol, 2012. 832: p. 173-183.
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