c-Fos試驗的關鍵技術參數(shù)：

動物處理：當計劃動物c-Fos試驗時，你應該意識到技術缺陷會影響到你的研究成果。例如，你應該考慮到c-Fos表達與時間有關，易受壓力影響，可在幾分鐘后就檢測到  (Herrera and Robertson, 1996)。重要的是要考慮到許多因素，如動物處理本身（例如針注射）或者在黑暗時期暴露于光下（節(jié)律激活）可影響c-Fos表達 (Asanuma and Ogawa, 1994; Herrera and Robertson, 1996)。因此，試驗必須精確計劃和實施，并須有合適的對照組，以避免假陽性結果。

IHC實驗方案：另一點你應該關心的是你的免疫組織化學（IHC）實驗方案。似乎c-Fos陽性細胞總數(shù)目取決于閾值。許多參數(shù)如：組織儲存條件、切片方法（低溫恒溫器或振動切片機）、染色參數(shù)（例如孵育溫度）、信號增強試劑，尤其是初級抗體的選擇都可影響c-Fos陽性細胞數(shù)目的檢測 (Berghorn et al., 1994; Werner et al., 1996; Mayer and Bendayan, 2001)。

c-Fos抗體：初級抗體間的特異性、敏感性和信噪比都不同，而這些特性會影響你試驗的結果。因此，我們的目標在于為科學研究和試驗重復性提供高特異性和一致性的c-Fos抗體。由于單克隆抗體與多克隆抗體相比擁有多種優(yōu)勢，因而我們開發(fā)了一種新的單克隆重組兔抗-c-Fos抗體。

單克隆重組c-Fos抗體的優(yōu)勢：

抗體共享一種由兩條重鏈和兩條輕鏈組成的常見結構。所有重鏈和輕鏈包含物種特異性恒定區(qū)和負責目標識別的可變序列 (Davies and Metzger, 1983)。

單克隆抗體制劑源于一個已確定的雜交瘤細胞系，所有單獨的抗體分子都是完全相同的，并共享相同的抗原識別位點。相反，多克隆抗體如兔c-Fos抗體226 003由具有不同目標識別序列的抗體分子混合物組成。一旦血清用完，新的動物必須被免疫。獲得的新血清包含具有新特異性和親和特性的c-Fos抗體的新混合物，導致多克隆c-Fos抗體的實驗性能在批次間產(chǎn)生差異。

使用單克隆重組兔c-Fos抗體226 008 ，可長久的解決批次間差異的問題。對表現(xiàn)一直優(yōu)異的大鼠單克隆c-Fos抗體226 017的c-Fos目標識別域進行測序，并將其與兔免疫球蛋白G的抗體恒定區(qū)融合。

圖1：單克隆重組兔c-Fos抗體的創(chuàng)建。為生成重組兔抗c-Fos抗體226 008，將單克隆大鼠抗- c-Fos抗體226 017的目標識別序列與兔特異性恒定抗體區(qū)域融合。

圖2：單克隆重組兔抗- c-Fos抗體226 008在所有的標準應用中都表現(xiàn)優(yōu)異。重組兔抗- c-Fos抗體226 008與單克隆大鼠抗c-Fos抗體226 017和多克隆兔抗c-Fos抗體226 003在相同試驗條件下相比。在IHC和IHC-P試驗中，c-Fos抗體可用于小鼠和大鼠海馬體切片的間接免疫染色（小鼠切片顯示；IHC：c-Fos = 紅色，DAPI = 藍色；IHC-P：c-Fos = 棕色，蘇木精 = 藍色）。在ICC試驗中，c-Fos抗體可用于大鼠海馬體神經(jīng)元的間接免疫染色（c-Fos = 紅色，MAP 2 188 011/188 002 = 綠色，DAPI = 藍色）。在免疫印跡試驗中，c-Fos可從TPA刺激的HeLa細胞的核提取物中檢測到（檢測方法：AP染色）。

這種高度定義的單克隆重組抗體可在受控條件下作為無限資源在哺乳動物細胞中表達，且批次間差異Z小。它在我們的測試標準應用中表現(xiàn)Z越，等同于或甚至好于兔多克隆c-Fos批次。多克隆兔抗c-Fos抗體226 003極易受試驗條件改變的影響（例如，IHC實驗中孵化溫度可影響信號強度），而單克隆重組兔抗c-Fos抗體226 008在不同試驗設置下染色結果依然穩(wěn)健，因此是你試驗的Z好選擇。

隨著時間推移，這種單克隆抗體將會被用于很多不同應用中，所有收集的信息都將有助于更好地描述此研究試劑。與多克隆抗體相反，這些信息不斷積累，永遠不會丟失，使這種研究試劑成為您手中越來越有價值和可靠的工具。