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在病理檢驗中,脂類染色法最常用于證明脂肪變性,脂肪栓子以及腫瘤的鑒別。脂滴(Lipid Droplet)是中性脂(主要有脂酰甘油和酯化膽固醇)的主要貯存場所,是脂肪細胞的主要成分,占據(jù)脂肪細胞的大部分空間。正常情況下,除脂肪細胞以外的其他細胞內(nèi)一般不見或僅能看到微量脂滴。但病理情況下,這些細胞中可能出現(xiàn)脂滴或者脂滴明顯增多,通過脂肪染色能將這些脂滴清晰的顯現(xiàn)出來。比如,心、肝、腎等實質(zhì)器官發(fā)生脂肪變性,胞漿內(nèi)出現(xiàn)大小不一的空泡,可用脂肪染色來區(qū)分是脂肪變性還是水性變性或糖原貯存等。

目前脂類染色使用最廣泛的染料是蘇丹染料,最常用的有蘇丹Ⅲ,蘇丹Ⅳ,蘇丹黑及油紅O等,這種脂肪染色方法,實際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現(xiàn)染料的顏色的過程,經(jīng)研究認為組織中脂質(zhì)在液態(tài)或半液態(tài)時,對蘇丹染料著色效果最好,根據(jù)這一原理,適當(dāng)提高溫度(37℃-60℃)會對組織切片產(chǎn)生較好的染色效果。
用蘇丹染料進行脂類染色,多用用冰凍或石蠟切片,以水溶性封固劑封固,如甘油明膠和阿拉伯糖膠等,在免疫組化研究中應(yīng)用較多。
蘇丹染料主要針對于組織切片的脂質(zhì)染色,同時靈敏度也較低,且存在操作過程中試劑揮發(fā)過多,易形成背景沉淀,無法兼容活細胞等局限。

油紅O染色小鼠肝臟結(jié)果
鑒于脂質(zhì)化學(xué)染料有上述諸多弊端,今天給大家?guī)韼卓顑?yōu)秀的脂質(zhì)熒光染料:
尼羅紅(Nile Red)(貨號:22190),尼羅紅是一種親脂性熒光染色劑,它是一類環(huán)境敏感性熒光染料,能夠在富含脂質(zhì)的環(huán)境中產(chǎn)生強烈的熒光,而在水性介質(zhì)中的熒光強度極小,這種特性使得它成為了一款極重要檢測細胞內(nèi)脂滴的熒光指示劑,可以通過熒光顯微鏡和流式細胞檢測結(jié)果。

Nile Red的結(jié)構(gòu)式
除了廣泛使用的尼羅紅,今天還給大家?guī)砹藷晒馊玖项I(lǐng)航者AAT Bioquest自研的升級版脂質(zhì)染色工具: Nile Green(貨號:22730)和Droplite Red(貨號:22735), 跟尼羅紅性質(zhì)類似,它們也是在富含脂質(zhì)的環(huán)境中具有強烈熒光的,而在水性介質(zhì)中具有最小的熒光。可用熒光顯微鏡,流式細胞術(shù)或熒光微孔板閱讀器檢測細胞內(nèi)脂液滴,是一類優(yōu)異的活細胞脂質(zhì)染料。 其中Nile Green僅染色細胞內(nèi)脂液滴,具有綠色熒光,它可以與其他熒光染料一起使用,用于多重染色,彌補了尼羅紅染色的缺陷。
染色結(jié)果賞析:
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| 處理10天后,MPCCs中糖誘導(dǎo)的中性脂質(zhì)積累: 引文:Long-term exposure to abnormal glucose levels alters drug metabolism pathways and insulin sensitivity in primary human hepatocytes by Davidson et al., Scientific Reports, June 2016. |
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| 尼羅紅染色IAA處理的褐藻(黃色是葉綠體,紅色是脂滴): 引文:Indole-3-acetic-acid-induced phenotypic plasticity in Desmodesmus algae by Chung et al., Scientific Reports, July 2018. |
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| 油酸處理的 HeLa 細胞脂滴染色(貨號:22730) |
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| 油酸處理的 HeLa 細胞(右)脂滴染色(貨號:22735) |
產(chǎn)品推薦:
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | Ex/Em |
| Nile Red *CAS 7385-67-3* | 22190 | 559nm/635nm |
| Cell Navigator Fluorimetric Lipid Droplet Assay Kit | 22730 | 485nm/520nm |
| Cell Navigator Fluorimetric Lipid Droplet Assay Kit | 22735 | 550nm/640nm |
| 脂肪變性比色分析試劑盒(油紅O) | 10012643 |
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艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商優(yōu)保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abbexa、Abnova、Agrisera、Anogen、Biosensis、Biovision、BioVendor、Caisson Labs、Cell Biolabs、Cytoskeleton、Demeditec、Duchefa、Epigentek、Equitech-Bio、EXBio、Fitzgerald、GeneCopoeia、Hycult Biotech、ImmunoReagents、ImmunoStep、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、Lumiprobe、Mabtech、Matreya、Norgen Biotek、Origene、ProImmune、ProSpec、ScyTek、Solis BioDyne、SouthernBiotech、StressMarq、SySy、US Biological、TRC等,可以在短時間內(nèi)為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。
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