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Synaptic Systems常見問題&FAQs
Synaptic Systems(SySy)品牌成立于德國,專注于研發(fā)和生產(chǎn)針對突觸和神經(jīng)科學(xué)相關(guān)抗體,以及用于細(xì)胞生物學(xué)、組織病理學(xué)和高分辨率顯微鏡的各種抗體,除此之外,還推出與SySy抗體配套使用的試劑盒、試劑等產(chǎn)品組合,全方面滿足客戶的各種需求。抗體產(chǎn)品線主要有:突觸活性區(qū)域相關(guān)抗體、突觸后蛋白相關(guān)抗體、RNA修飾如m6A抗體、突觸粘附蛋白抗體、SNARE相關(guān)抗體、Alzheimer's相關(guān)抗體、細(xì)胞骨架、離子通道相關(guān)抗體等。
那么接下來為各位同學(xué)整理出常見問題,希望這能幫到您。(重組以及儲存)
1. 我應(yīng)該如何重組抗體?
我們所有純化的抗體都是從PBS中凍干的。
所以這也就解釋了為什么好多同學(xué)疑問:我加了水以后到底是PBS溶液,還是正常溶液。
①為了在PBS中重組抗體,加入說明書中給出的去離子水的量。
所有的抗體都是在PBS中凍干,加了水,也就變成了PBS溶液,加水復(fù)溶到對應(yīng)濃度即可,然后分裝保存避免反復(fù)凍融~
如果需要更大的體積,按上述方法加水,然后加入所需量的PBS和穩(wěn)定載體蛋白(如BSA)至最終濃度為2%。
注:由于一些抗體已經(jīng)含有白蛋白。在添加更多的載體蛋白時要考慮到這一點(diǎn)。
②如果需要,添加少量疊氮化物或硫柳汞,以防止微生物生長。如果你想保持4°C的溫度儲存,特別建議這樣做!
③重組熒光標(biāo)記抗體后,加入1:1 (v/v)的甘油至終濃度為50%。這降低了你的抗體的凝固點(diǎn),使你的抗體在-20°C時保持液態(tài)。
注:甘油也可以添加到未標(biāo)記的一抗中。這是一種避免凍融循環(huán)的合適方法。
2. 我應(yīng)該如何儲存抗體?
收到抗體時:
我們所有的抗體和對照蛋白/肽都是凍干(真空冷凍干燥)粉末運(yùn)輸?shù)模诃h(huán)境溫度下保持穩(wěn)定,幾周內(nèi)不會損失質(zhì)量。
①未標(biāo)記和生物素標(biāo)記的抗體和對照蛋白在重組前應(yīng)保存在4°C。當(dāng)它們還在凍干狀態(tài)時,千萬不要儲存在冰箱里! 溫度低于0°C可能會導(dǎo)致性能下降。
②收到熒光標(biāo)記抗體后應(yīng)立即重組。長期儲存(幾個月)可能導(dǎo)致聚集。
③對照肽重組前,應(yīng)保存在-20°C。
重組后的長期儲存(一般考慮)
①儲存冷凍室不能是無霜(“無霜冷凍室”):這種凍結(jié)和解凍之間的循環(huán)(以減少結(jié)霜),正是應(yīng)該避免的。出于同樣的原因,抗體小瓶應(yīng)放在冷凍室溫度波動最小的區(qū)域,例如靠后而不是放在門架上。
②將抗體等分,并冷凍保存(-20°C至-80°C):避免非常小的等分(低于20ul),并使用盡可能小的儲存瓶或管。等分越小,抗體在儲存瓶或管表面的蒸發(fā)和吸附對儲存液濃度的影響越大。
注:抗體在表面的吸附會導(dǎo)致活性的大量喪失。
③將甘油添加到最終濃度為50%時,并將抗體保持在-20°C的液態(tài)。這有效地避免了凍結(jié)和解凍循環(huán)。
產(chǎn)品存儲的具體提示
Control proteins / peptides
儲存于-20°C~ -80°C
Monoclonal Antibodies
Ascites和hybridoma supernatant應(yīng)保存在-20°C ~ -80°C。
不建議在4°C下長時間儲存! 與血清不同,腹水可能含有蛋白酶,可降解抗體。
Purified IgG應(yīng)保存在-20°C~ -80°C。添加像BSA這樣的載體蛋白會增加長期穩(wěn)定性。我們的許多抗體已經(jīng)含有載體蛋白。詳細(xì)資料請參閱數(shù)據(jù)表。
Polyclonal Antibodies
Crude antisera:添加抗微生物藥物后,可在4℃保存。 然而,最佳儲存(-20°C ~ -80°C)。
Affinity purified antibodies
不如抗血清穩(wěn)定。建議在-20°C ~ -80°C下保存。添加像BSA這樣的載體蛋白會增加長期穩(wěn)定性。我們的大多數(shù)抗體已經(jīng)含有載體蛋白。詳細(xì)資料請參閱數(shù)據(jù)表。
Fluorescence-labeled Antibodies
用1:1 (v/v)甘油,在-20°C下保存。保護(hù)這些抗體免受光照。
重點(diǎn):避免所有抗體重復(fù)凍融循環(huán)!

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