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酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
碳酸氫鹽/碳酸鹽包被緩沖液(100mM) pH9.6
抗原或抗體應用包被緩沖液稀釋,以使其固定在孔內(nèi):
? 29mM 碳酸鈉
? 71mM 碳酸氫鈉
封閉液:
常用的封閉試劑為1% 牛血清白蛋白、血清、脫脂奶粉、酪蛋白、明膠,用PBS 溶解。
洗滌液:
常用PBS 或含去垢劑(如體積百分數(shù)0.05% 吐溫20)的三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH 7.4) (TBST)
抗體稀釋緩沖液:
一抗和二抗應用1 倍的封閉液稀釋,以減少非特異結(jié)合。
流式細胞術(shù)
熒光激活細胞分類檢測(FACS)緩沖液/抗體稀釋緩沖液
10% 胎牛血清
1% 疊氮化納
溶解于PBS 中
細胞穿透液
0.1-1% 聚乙二醇辛基苯基醚/乙基苯基聚乙二醇
溶解于PBS 中,也可用吐溫20,皂甙,洋地黃皂甙和Leucoperm 等溫和的細胞膜溶解物。使用濃度0.5%,溶解于PBS 中
固定液
0.01%-0.1% 多聚甲醛,溶解于PBS 中
免疫沉淀(IP)
緩沖液配制方法見免疫印跡(western blot)部分
RIPA(放射性免疫測定)緩沖液
緩沖液配制方法見免疫印跡部分
染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)
FA裂解緩沖液
50mM 羥乙基哌嗪乙磺酸-氫氧化鉀,pH 值7.5
140mM 氯化鈉
1mM 乙二胺四乙酸,pH 值8.0
1% 的聚乙二醇辛基苯基醚
0.1% 的去氧膽酸鈉
0.1% 十二烷基硫酸鈉
蛋白酶抑制劑
RIPA(放射性免疫測定)緩沖液
50mM 三羥甲基氨基甲烷-氯化氫,pH 值8.0
150mM 氯化鈉
2mM 乙二胺四乙酸,pH 值8.0
1% 乙基苯基聚乙二醇
0.5% 去氧膽酸鈉
0.1% 十二烷基硫酸鈉
蛋白酶抑制劑
洗滌緩沖液
0.1% 十二烷基硫酸鈉
1% 的聚乙二醇辛基苯基醚
2mM 的乙二胺四乙酸,pH 值8.0
150mM 的氯化鈉
20mM 三羥甲基氨基甲烷-氯化氫,pH 值8.0
末次洗滌緩沖液
0.1% 十二烷基硫酸鈉
1% 聚乙二醇辛基苯基醚
2mM 乙二胺四乙酸,pH 值8.0
500mM 氯化鈉
20mM 三羥甲基氨基甲烷-氯化氫,pH 值8.0
洗提緩沖液
1% 十二烷基硫酸鈉
100mM 碳酸氫鈉
蛋白酶K
用蒸餾水溶解,濃度為20mg/ml,-20°C 凍存。
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