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RT-PCR

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時(shí)間:2021-05-19     
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Protocol: TaKaRa One Step RNA PCR Kit (AMV)


1.按下列組成在 PCR 反應(yīng)管中調(diào)制反應(yīng)液


pcr1.png

pcr2.png


       1.反應(yīng)總體積根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)控,可以做 20~50?l 以節(jié)約試劑;


       2. 將上表各成分加入到 0.2ml 或 0.5ml 滅菌的 PCR 薄壁管中;


3. 如果不用 PCR 儀的加熱蓋,在反應(yīng)混合液的上層加 30 ~50?l 的礦物油防止樣品在 PCR 的過(guò)程中蒸發(fā);


2.按以下條件進(jìn)行反應(yīng)


step1.png

step2.png


反應(yīng)結(jié)束后,抽取擴(kuò)增樣品 5ul,用瓊脂糖凝膠電泳分析擴(kuò)增結(jié)果,用DNAmarker 判斷擴(kuò)增片段的大小或冷凍保存,以備以后分析使用。

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