本試劑盒用于酶免疫測定法定量測定人血清中的瘦素。此套件僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品瘦素ELISA試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

瘦素ELISA試劑盒測定原理：

以下酶免疫測定的原理遵循典型的兩步捕獲或“三明治”型測定。該檢測利用了兩種高度特異性的單克隆抗體：將瘦素特異性的單克隆抗體固定在微孔板上，將瘦素不同表位特異性的雙克隆抗體與生物素結(jié)合。在第一步中，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品中存在的瘦素與固定抗體和生物素化抗體結(jié)合，從而形成三明治復(fù)合物。通過洗滌步驟去除過量和未結(jié)合的生物素化抗體。第二步，加入鏈霉抗生物素蛋白-HRP，它能特異性結(jié)合任何結(jié)合的生物素化抗體。同樣，未結(jié)合的鏈霉抗生物素蛋白-HRP通過洗滌步驟去除。接下來，加入酶底物（TMB），形成與瘦素含量成正比的藍(lán)色產(chǎn)物。通過加入終止溶液使酶反應(yīng)停止，將藍(lán)色轉(zhuǎn)化為黃色。在450nm處用微量滴定板讀數(shù)器測量吸光度。使用一組標(biāo)準(zhǔn)來繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，從中可以直接讀取樣品和對照中的瘦素含量。

程序注意事項和警告：

1. 本試劑盒僅供研究使用，不用于診斷程序。

2. 處理試劑盒試劑時，應(yīng)遵循以下良好的實驗室操作規(guī)范：

- 不要用口吸管。

- 在處理樣品或試劑盒試劑的區(qū)域不要吸煙、飲食。

- 處理樣品和試劑盒試劑時穿戴防護服和一次性手套。

- 測試后徹底洗手。

- 避免與眼睛接觸；使用安全眼鏡。如果發(fā)生接觸，請立即用水沖洗并聯(lián)系醫(yī)生。

3. 用戶應(yīng)充分理解本協(xié)議，以成功使用此試劑盒。只有嚴(yán)格遵守和仔細(xì)遵循提供的說明，才能獲得可靠的性能。

4. 不要使用超過標(biāo)簽上標(biāo)明的有效期的試劑盒。

5. 如果試劑盒試劑明顯損壞，請勿使用試劑盒。

6. 不要在測試中使用不同試劑盒批次的組分，并且不要使用任何超過標(biāo)簽上打印的有效期的組分。

7. 所有試劑盒試劑和樣品在使用前應(yīng)置于室溫并輕輕但徹底混合。避免反復(fù)凍融試劑和樣品。

8. 當(dāng)指定使用水進行稀釋或重組時，使用去離子水或蒸餾水。

9. 使用后，試劑盒的每個單獨組分必須立即返回標(biāo)簽上標(biāo)明的推薦儲存溫度。

10. 每次運行都必須建立校準(zhǔn)曲線。

11. 建議所有客戶準(zhǔn)備自己的控制材料或血清池，應(yīng)在每次運行中包括高濃度和低濃度水平，以評估結(jié)果的可靠性。

12. 試劑盒中包含的對照品應(yīng)在每次運行中包含，其結(jié)果必須落在質(zhì)量控制證書中規(guī)定的范圍內(nèi)。對照品結(jié)果失敗可能表明操作技術(shù)不當(dāng)或吸管使用不當(dāng)、洗滌不完全或試劑儲存不當(dāng)。

13. 分發(fā)底物和終止溶液時，不要使用允許這些液體與任何金屬部件接觸的吸管。

14. 底物溶液（TMB）對光敏感，如果適當(dāng)儲存，應(yīng)保持無色。如果出現(xiàn)藍(lán)色，則不應(yīng)使用，這可能表明不穩(wěn)定性或污染。

15. 不要使用嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重脂血、黃疸或儲存不當(dāng)?shù)难濉?/p>

16. 含有疊氮化物或硫柳汞的樣品或?qū)φ掌放c此試劑盒不兼容。它們可能導(dǎo)致虛假結(jié)果。

17. 超出試劑盒測量范圍的樣品值可能會報告為>100 ng/mL。如果需要進一步稀釋和重新測試，只能使用測定緩沖液稀釋血清樣品。使用任何其他試劑可能導(dǎo)致虛假結(jié)果。

18. 避免試劑的微生物污染。

19. 為了防止試劑污染，分配每種試劑、樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和對照品時使用新的一次性吸管頭。

20. 為了防止試劑污染，不要將試劑倒回原容器。

21. 試劑盒試劑必須被視為危險廢物，并根據(jù)當(dāng)?shù)睾?或國家規(guī)定進行處理。

22. 使用試劑盒的消耗品，如果可能含有生物危害（例如吸管頭、瓶子或含有人體材料的容器），必須按照生物安全實踐處理，以最小化感染風(fēng)險，并根據(jù)當(dāng)?shù)睾?或國家有關(guān)生物危害廢物的規(guī)定進行處理。

23. 試劑盒中的終止溶液組分含有1M硫酸。不要將酸與含有疊氮化鈉或次氯酸鈉的廢物混合。

24. 在操作生物危害或生物污染的溶液時，強烈建議使用安全眼鏡和一次性塑料。

25. 需要正確校準(zhǔn)與此測試一起使用的設(shè)備，例如吸管和吸光度微孔板閱讀器。

26. 如果測定程序需要微孔板振蕩器，則所需振蕩器的類型和速度在“需要但未提供的試劑和設(shè)備”部分中說明。使用的振蕩器類型和速度都會影響光密度和測試結(jié)果。如果使用不同類型的振蕩器和/或速度，用戶負(fù)責(zé)驗證試劑盒的性能。

27. 不要重復(fù)使用微孔板孔。它們僅供一次性使用。

28. 為了避免在潮濕環(huán)境中微孔板孔內(nèi)的凝結(jié)，直到微孔板達(dá)到室溫之前，不要打開包含微孔板的袋子。

29. 當(dāng)讀取微孔板時，微孔中的氣泡會影響光密度（OD）。在執(zhí)行讀取步驟之前，仔細(xì)移除任何氣泡。

典型校準(zhǔn)器曲線：

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。