ALPCO C肽ELISA用于定量測定人血清和血漿中的C肽。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品c-肽ELISA。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

c-肽ELISA 檢測方案：

ALPCO C肽ELISA是一種夾心型免疫測定法。96孔微孔板上涂有C肽特異性單克隆抗體。將標(biāo)準(zhǔn)品、對照品和樣品與測定緩沖液一起添加到微孔板孔中。然后將微孔板在微孔板振蕩器上以700-900rpm的速度在室溫下孵育。第一次孵育完成后，用洗滌緩沖液洗滌孔并吸干。然后加入共軛物，在微孔板振蕩器上以700-900rpm第二次孵育微孔板，洗滌并吸干。加入TMB底物，在室溫下在微孔板振蕩器上以700-900rpm第三次孵育微孔板。第三次孵育完成后，加入StopSolution，用分光光度計在450nm處測量光密度（OD）。產(chǎn)生的顏色強度與樣品中C肽的量成正比。

所需材料：

用于分配高達100微升的精密移液管（帶一次性吸頭）

用于分配高達100微升的可重復(fù)使用或多通道移液管

用于試劑配制的容量瓶和移液管

用于試劑配制的蒸餾水或去離子水

微孔板洗滌器或洗滌瓶

能夠以700-900轉(zhuǎn)每分鐘的速度工作的微孔板振蕩器

帶有450納米濾光片的微孔板閱讀器

用于樣本準(zhǔn)備的渦旋混合器

注意事項：

試劑盒中包含的人血液制品已針對HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的存在進行了檢測。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的完全不存在；因此，所有試劑應(yīng)被視為潛在的傳染性物質(zhì)。處理和處置應(yīng)符合所有適當(dāng)?shù)膰液偷胤疥P(guān)于潛在生物危害材料處理的規(guī)定。

所有來源于動物的材料均為瘋牛病陰性。然而，所有材料應(yīng)遠(yuǎn)離反芻動物。

避免與皮膚直接接觸。

本產(chǎn)品不可內(nèi)服。

使用本產(chǎn)品時，避免進食、飲水或吸煙。

不要用口吸任何試劑。

試劑盒中的試劑是特定批次的，不得替換。

不要使用超過有效期的試劑。

不建議對測試程序進行變更，這可能會影響測試結(jié)果。

測定程序：

所有試劑和微孔板條在開封前應(yīng)平衡至室溫（18-25°C）。使用前輕輕混合所有試劑。每次測定運行和每次使用多個微孔板時，都必須執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)曲線。所有標(biāo)準(zhǔn)品、對照品和樣本都應(yīng)雙重運行。

1. 在打開鋁箔袋前，應(yīng)先將微孔板平衡至室溫。為標(biāo)準(zhǔn)品、對照品和樣本的雙重測定分配足夠的微孔板條。其余的微孔板條應(yīng)存放在含干燥劑的密封鋁箔袋中，置于2-8°C。

2. 將每個標(biāo)準(zhǔn)品、對照品和樣本的25微升分別吸入相應(yīng)的孔中。見試劑準(zhǔn)備。

3. 向每個孔中加入50微升的測定緩沖液。

4. 用板封膜覆蓋微孔板，在室溫下孵育1小時，在微孔板振蕩器上以700-900轉(zhuǎn)每分鐘的速度搖動。

5. 倒掉孔中的內(nèi)容物，使用微孔板洗滌器用每次350微升的工作強度洗滌緩沖液洗板6次（見試劑準(zhǔn)備）。或者，使用帶有洗滌噴嘴的洗滌瓶將工作強度洗滌緩沖液注入孔中。（不建議使用多通道移液管。必須以足夠且均衡的力量分配洗滌緩沖液，以便正確洗滌孔。）每次洗滌之間，將微孔板倒置以丟棄液體，并在吸水紙上用力拍打倒置的微孔板。在最后洗滌后（自動或手動），通過倒置并用力拍打微孔板在吸水紙上，去除孔中的任何殘留洗滌緩沖液和氣泡。

6. 向每個孔中加入100微升的工作強度結(jié)合物（見試劑準(zhǔn)備）。

7. 用板封膜覆蓋微孔板，在室溫下孵育1小時，在微孔板振蕩器上以700-900轉(zhuǎn)每分鐘的速度搖動。

8. 倒掉孔中的內(nèi)容物，并用350微升的工作強度洗滌緩沖液洗板6次（見步驟5）。

9. 向每個孔中加入100微升的TMB底物。

10. 用板封膜覆蓋微孔板，在室溫下孵育15分鐘，在微孔板振蕩器上以700-900轉(zhuǎn)每分鐘的速度搖動。

11. 向每個孔中加入100微升的終止溶液，并輕輕搖動微孔板以混合內(nèi)容物。在進行下一步之前，去除任何氣泡。

12. 將微孔板放入能夠讀取450納米吸光度的微孔板閱讀器中。在加入終止溶液后應(yīng)立即分析微孔板，且不得超過30分鐘。

文獻參考：

1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。