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細胞自噬(autophagy)是一種由溶酶體介導(dǎo)的降解過程,細胞通過形成具有雙層膜囊狀結(jié)的自噬體,包裹細胞質(zhì)的一部分,并運送到溶酶體,進行降解及回收利用。正常情況下細胞內(nèi)的自噬水平較低,在饑餓或應(yīng)激時可迅速上調(diào)。這種降解活動有助于在生物能量需求升高期間提供營養(yǎng)物質(zhì)(氨基酸、核苷酸、脂肪酸等)和能量。自噬的另一個功能是協(xié)助檢測和破壞細胞內(nèi)病原體(病毒、細菌和寄生蟲)。自噬失調(diào)與許多疾病有關(guān),包括癌癥、感染和退行性疾病。

細胞自噬是一個動態(tài)過程,通常分為三個階段: 在第一階段,需要被降解的細胞質(zhì)組分被隔離在雙膜自噬體內(nèi),在第二階段,自噬體與溶酶體融合形成自噬溶酶體或自溶酶體,在第三階段,自噬體內(nèi)容物發(fā)生降解。
美國ICT提供的自噬檢測試劑盒使研究人員能夠在體外檢測和監(jiān)測活細胞自噬。試劑盒中的紅色自噬探針是一種可以穿透細胞的脂肪族分子,當插入自噬體和自溶酶體的脂膜時發(fā)出明亮的熒光。該紅色自噬探針可以通過流式細胞儀檢測。
| 貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 組分 | 優(yōu)勢 |
| 9156 | Autophagy Assay, Red (Ex/Em=590nm/620 nm) | 50Tests | 1. Autophagy Probe, Red 2. 10X Cellular Assay Buffer 3. Fixative | 全細胞自噬的快速定量檢測;不需要轉(zhuǎn)染 |
| 9157 | 200Tests |
* 僅供科研使用,不得用于醫(yī)療.

采用ICT的自噬檢測試劑盒(貨號9156、9157)檢測Jurkat細胞的自噬水平。用0.5?M雷帕霉素(橙色)、10?M氯喹(藍色)或同時用0.5?M雷帕霉素和10?M氯喹(紅色)處理細胞18小時。自噬探針Red染色60 min后洗滌細胞,采用流式細胞儀(配備綠/黃激光(561 nm激發(fā))和610/20發(fā)射型濾光片)進行分析。直方圖的疊加顯示在右邊。顯示中位數(shù)熒光信號、%陰性和%陽性細胞的表如上所示。雷帕霉素或氯喹處理后與未處理的對照組相比熒光信號增強。雷帕霉素和氯喹聯(lián)合處理后,熒光信號進一步增強。
【文章鑒賞】 Evaluation of the Anticancer Activities of Novel Transition Metal Complexes with Berenil and Nitroimidazole. Molecules. 2020 Jun 21;25(12):2860


美國ICT除了可提供全面的細胞活性檢測相關(guān)試劑,包括凋亡、 caspase、 自噬、細胞毒性、壞死等相關(guān)檢測,還可以同時提供高質(zhì)量高靈敏度的 ELISA以及相關(guān)試劑,包括包被液、封閉液、沖洗液、底物、終止液、板子等等。
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