關(guān)于細(xì)胞凋亡的檢測產(chǎn)品，市面上屢見不鮮，但是大部分都是針對體外（in vitro）細(xì)胞的，活體(in vivo)細(xì)胞的凋亡檢測卻不多見。ImmunoChemistry Technologies（簡稱“ICT”）的FLIVO系列產(chǎn)品，能夠用于細(xì)胞凋亡活體檢測。

       FLIVO(FLuorescence in vIVO)探針是細(xì)胞滲透性、無毒性的天冬氨酸蛋白酶(Caspases)熒光抑制劑，含有纈氨酸－丙氨酸－天冬氨酸(VAD)氨基酸序列，該序列是活性Caspase的靶點(diǎn),夾在熒光標(biāo)記和氟甲基酮(FMK)之間。靜脈注射后，F(xiàn)LIVO通過體循環(huán)，在細(xì)胞中不斷擴(kuò)散。如果細(xì)胞內(nèi)存在活性Caspase，F(xiàn)LIVO將與Caspase上的半胱氨酸形成不可逆的共價(jià)鍵。因此只要細(xì)胞膜完好，結(jié)合的FLIVO探針就會(huì)留在細(xì)胞內(nèi)，從而被標(biāo)記上熒光，未結(jié)合的FLIVO則在動(dòng)物的體循環(huán)中被清除，動(dòng)物體內(nèi)剩下的信號(hào)就是對caspase活性的直接測定。所以FLIVO可以用于檢測活體動(dòng)物體內(nèi)Caspase介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡、焦亡。FLIVO非常敏感，自然發(fā)生的低水平細(xì)胞凋亡也會(huì)被檢測到。  

       ICT可提供FLIVO試劑盒和示蹤劑,包含的FLIVO探針由熒光基團(tuán)、VAD序列和氟甲基酮(FMK)組成夾心結(jié)構(gòu)，熒光基團(tuán)用來檢測熒光，VAD序列是活性caspase靶點(diǎn)，F(xiàn)MK有助于與活性caspase形成共價(jià)鍵。  

       FLIVO體內(nèi)（in vivo）天冬氨酸蛋白酶(Caspases)活性檢測試劑盒

       利用FAM-FLIVO監(jiān)測細(xì)胞死亡，健康神經(jīng)元和凋亡神經(jīng)元之間有明顯的區(qū)別。在對糖尿病的活體動(dòng)物大腦研究中，對照大鼠(左)和8周STZ糖尿病大鼠(右)的caspase活性來評估神經(jīng)退行性變。在大鼠死亡前30分鐘靜脈注射FAM-FLIVO(貨號(hào)#981)，直接標(biāo)記caspase陽性凋亡神經(jīng)元。死亡后，制備20um冰凍切片的導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)(PAG)，用紅色熒光Nissl反染色，以識(shí)別所有神經(jīng)元。瀕死的凋亡神經(jīng)元(左)顯示FAM-FLIVO(黃/綠色)和Nissl(紅色)雙重染色。在該模型中，糖尿病動(dòng)物導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)中caspase活性水平高于對照組動(dòng)物。 

       FLIVO示蹤劑

       * 僅供科研使用，不得用于醫(yī)療. 

       在小鼠腦內(nèi)接種活金黃色葡萄球菌后誘發(fā)腦膿腫。動(dòng)物在感染后17小時(shí)靜脈注射NIR-FLIVO 690示蹤劑(貨號(hào)#9112)或NIR-FLIVO 690游離染料對照劑(貨號(hào)#9113)，然后在1小時(shí)后使用IVIS?Spectrum?從離體大腦組織中獲得信號(hào)。在注射NIR-FLIVO 690示蹤劑(右圖)后，強(qiáng)烈的caspase活性與腦膿腫相關(guān)，而在注射NIR-FLIVO 690游離染料對照劑(左圖)的動(dòng)物中檢測到極少的信號(hào)。 

       使用CRi Maestro?成像系統(tǒng)，使用NIR-FLIVO 747示蹤劑(貨號(hào)#9114)對小鼠腫瘤模型中的凋亡組織進(jìn)行體內(nèi)成像。NIR-FLIVO 747示蹤劑用于無創(chuàng)監(jiān)測一種實(shí)驗(yàn)性抗癌治療的療效和時(shí)間動(dòng)力學(xué)。在接受安慰劑或?qū)嶒?yàn)治療后，陰性對照小鼠(左圖)和實(shí)驗(yàn)治療小鼠(右圖)靜脈注射NIR-FLIVO 747示蹤劑，并在不同時(shí)間點(diǎn)使用CRi Maestro?成像系統(tǒng)進(jìn)行無創(chuàng)成像。實(shí)驗(yàn)組被試的凋亡腫瘤組織呈亮藍(lán)色熒光，表明實(shí)驗(yàn)治療有凋亡效應(yīng)。  

       FLIVO探針的活體使用對藥物測定研究很有價(jià)值，因?yàn)橥ㄟ^活體動(dòng)物的熒光成像可測定藥物反應(yīng)性所引起的凋亡水平升高或降低。凋亡水平的升高使得粘附的探針更多，因此熒光強(qiáng)度增加。此外，活體技術(shù)避免了從動(dòng)物上取出細(xì)胞和組織的需要，這會(huì)進(jìn)一步誘導(dǎo)凋亡。    

       美國ICT除了可提供全面的細(xì)胞活性檢測相關(guān)試劑，包括凋亡、 caspase、 自噬、細(xì)胞毒性、壞死等相關(guān)檢測，還可以同時(shí)提供高質(zhì)量高靈敏度的 ELISA以及相關(guān)試劑，包括包被液、封閉液、 沖洗液、 底物、 終止液、 板子等等。    

       看到這兒，您心動(dòng)了嗎？馬上聯(lián)系小艾吧！