Biovision品牌細胞自噬工具

發(fā)布者：艾美捷科技發(fā)布時間：2021-07-01

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細胞自噬就是細胞自己降解自己結(jié)構(gòu)的過程，即把一些暫時用不上的零件，拆解變成最小的模塊，然后重新組裝成自己需要的東西。

細胞自噬的分類：

自噬是細胞內(nèi)分解代謝的一種途徑，除此之外還有另一種我們熟知的途徑——泛素蛋白酶體途徑。細胞自噬其實分為三種方式，這是根據(jù)如何“打包”物質(zhì)和如何運送物質(zhì)來劃分的。

第一種叫巨自噬（macroautophagy），顧名思義就是自噬體比較大，用細胞膜或者其他的雙層膜去把那些不想要的東西包裹起來，然后和溶酶體融合。

第二種叫微自噬（microautophagy），顧名思義就是自噬體比較小，溶酶體或者液泡直接用自身去吞噬那些需要降解的東西，也許是細胞器，也許是蛋白質(zhì)。

第三種叫分子伴侶介導(dǎo)自噬（chaperone-mediated autophagy），是指分子伴侶將細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)先從折疊狀態(tài)恢復(fù)為未折疊的狀態(tài)，再放到溶酶體里。

自噬的關(guān)鍵過程：

自噬5大關(guān)鍵過程：

（1）自噬泡（phagophore）的形成：

（2）Atg5-Atg12-Atg16L復(fù)合物形成并與自噬泡融合；

（3）微管相關(guān)蛋白輕鏈3（microtubule-associatedprotein light chain3，LC3）由可溶解形式（LC3-I）轉(zhuǎn)變?yōu)橹苄问剑↙C3-II）,與自噬泡結(jié)合形成自噬體。

（4）自噬體捕獲需降解或清除的蛋白質(zhì)、細胞器等物質(zhì)；

（5）自噬體與溶酶體結(jié)合形成自噬溶酶體（autolysosomes），在自噬溶酶體內(nèi)自噬體內(nèi)層膜，內(nèi)容物在溶酶體內(nèi)降解。過程詳見下圖。


起始	延伸	融合	降解
Initiation	Expansion	Fusion	Degradation
自噬發(fā)生圖解。UKL和Beclin 1蛋白復(fù)合物起始自噬泡的形成，Atg5/12/16與LC3-II負責(zé)自噬體的延伸，最后自噬體與溶酶體融合，釋放內(nèi)容物，完成自噬。

mTOR背景：

mTOR 是雷帕霉素在哺乳動物中的靶點（mammalian target of rapamycin，mTOR），作為一種重要的蛋白激酶，它在細胞生長、增殖、蛋白質(zhì)合成、自噬等生物學(xué)過程中發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。

mTOR 作為主要組分存在于 mTOR 復(fù)合體 I 和復(fù)合體 II 中，其中mTOR 復(fù)合體 II 是線粒體通透性的主要調(diào)控者。

自噬發(fā)生的條件及研究的意義：

細胞發(fā)生自噬是一個非常“保守”的過程，幾乎沒有進化。細胞自噬的出現(xiàn)是為了適應(yīng)環(huán)境，尤其是碰上了“不好的年景”，比如缺乏營養(yǎng)、饑餓難耐，或者細胞中氧氣、水分特別少的時候，就需要自噬了。

自噬的研究對于臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域非常重要，比如，腫瘤經(jīng)常在環(huán)境非常差的時候還能生長，就是因為腫瘤細胞的自噬非常劇烈。所以理論上如果阻斷了腫瘤細胞的自噬，它們不是就不會生長了嗎？再比如一些神經(jīng)退行性疾病，如帕金森，就是大腦里出現(xiàn)了一些錯誤折疊的蛋白質(zhì)，而且還清除不掉，本質(zhì)上也是自噬出了問題。

細胞自噬研究相關(guān)產(chǎn)品：

1、MTOR檢測試劑盒：

貨號	名稱	產(chǎn)品描述
K4179	mTOR (Human) ELISA試劑盒	定量測定血清，血漿，組織勻漿，培養(yǎng)上清液和其他生物液體中的mTOR

2、自噬抑制劑：

貨號	名稱	產(chǎn)品描述
2249	3-甲基腺嘌呤	3-甲基腺嘌呤常用作自噬螯合的特異性抑制劑，它通過抑制III型磷脂酰肌醇3-激酶（PI-3K）來阻止自噬體形成，從而抑制自噬
1685	ATM激酶抑制劑，KU-55933	KU-55933是ATM激酶的有效抑制劑，選擇性的和ATP競爭（Ki = 2.2 nM； IC 50 = 13 nM），它抑制DNA-PK，mTOR，PI 3-K，PI 4-K和ATR需要更高的濃度（IC 50分別為2500、9300、16600，> 100000和> 100000 nM）
B2260	Autophinib	Autophinib是一種有效的自噬抑制劑，它通過靶向作用于脂質(zhì)激酶VPS34來抑制饑餓或雷帕霉素誘導(dǎo)的自噬。
1829	桿菌素A1	桿菌素A1一種體外高效的液泡H + -ATPases（V-ATPases）抑制劑，在動物細胞，植物細胞和微生物中納克級即可起作用；對其他ATP水解酶如F-ATP酶，Ca 2+ -ATP酶，Na + / K + -ATP酶和質(zhì)膜H + -ATP酶也具有選擇性，通過抑制自噬小體和溶酶體之間的融合起作用，還可在后期防止自噬。
1825	氯喹二磷酸酯	抗瘧藥，通過不同于3-甲基腺嘌呤的機制抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞的自噬。
1711	G? 6976	G? 6976是一種細胞可滲透的，有效的蛋白激酶C（PKC）抑制劑（IC 50 = 7.9 nM）。在體外，區(qū)分PKC的Ca 2+依賴性和非依賴性的同工型；選擇性抑制PKCα和PKCβ1（IC 50分別為2.3nM和6.2 nM），但不抑制PKCδ，-ε或-ζ的活性（IC 50> 3?M）
B2051	硫酸羥氯喹	羥氯喹是合成奎寧衍生物，通常用作抗瘧藥，羥氯喹還用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和盤狀或系統(tǒng)性紅斑狼瘡。它抑制自噬并誘導(dǎo)自噬細胞死亡（IC 50 = 30 ?M），表明其在研究和醫(yī)學(xué)中的潛在應(yīng)用。
B2378	IITZ-01	IITZ-01是有效的溶血同性自噬抑制劑，表現(xiàn)出比氯喹（Cat：1825）強十倍的自噬抑制作用；增強自噬體的積累，但通過削弱溶酶體功能抑制自噬體的降解，最終導(dǎo)致自噬的抑制，顯示有效的抗癌活性。
B2117	Lys01三鹽酸鹽	Lys01 trihydrochloride（Lys05）是一種有效的水溶性溶酶體自噬抑制劑，在MTT分析中對1205Lu，c8161，LN229和HT-29細胞系的IC50值分別為3.6、3.8、6和7.9μM。
9419	MHY1485	MHY1485是一種mTOR激活劑，可通過抑制自噬小體和溶酶體之間的融合來有效抑制自噬。MHY1485處理可抑制基礎(chǔ)自噬通量，這種抑制作用已在饑餓中的細胞中得到了證實，饑餓是自噬的強大生理誘導(dǎo)劑。
B1286	SAR-405	SAR-405是一種有效的選擇性PIK3C3 / Vps34抑制劑，可防止自噬并與腫瘤細胞中的mTOR抑制協(xié)同作用。
2037	Spautin-1	Spautin-1是一種細胞可滲透性的，哺乳動物細胞中特異且有效的自噬抑制劑。它通過抑制兩個針對Vps34復(fù)合物Beclin1亞基的泛素特異性肽酶USP10和USP13來促進Vps34 PI3激酶復(fù)合物的降解。Spautin-1會阻斷癌細胞中的生存自噬途徑。

3、自噬誘導(dǎo)劑：

貨號	名稱	產(chǎn)品描述
1828	鹽酸胺碘酮	鹽酸胺碘酮是一種具有廣泛殺真菌活性的非選擇性離子通道阻滯劑，胺碘酮可導(dǎo)致啤酒酵母中Ca2 +立即流入，隨后線粒體破碎和細胞死亡，也充當(dāng)自噬誘導(dǎo)劑。
B2297	AR7	AR-7，也稱為非典型類維生素A 7，是伴侶蛋白介導(dǎo)的自噬（CMA）有效的選擇性增強劑，充當(dāng)RARα的化學(xué)激活劑。
2391	C2-二氫神經(jīng)酰胺	C2神經(jīng)酰胺的有用陰性對照（貨號2390-5，25），也充當(dāng)自噬誘導(dǎo)劑。
2684	鹽酸可樂定	可樂定是一種降壓藥，可作為α2-腎上腺素能受體激動劑，可通過集中抑制交感神經(jīng)活動來降低外周血管阻力，可樂定的抗高血壓作用也歸因于其對咪唑啉（I1）受體的激動作用（Ki = 4-8 nM），也可作為獨立于mTOR的自噬增強劑。
1686-5	多索嗎啡	多索嗎啡是一種細胞滲透性的，選擇性，可逆，具有ATP競爭性的AMP活化蛋白激酶（AMPK）抑制劑（在5 ?M ATP且無AMP的情況下，Ki = 109 nM），不僅影響包括JAK3，PKA，PKCθ，SYK和ZAPK在內(nèi)的幾種與結(jié)構(gòu)相關(guān)的激酶的活性，還抑制I型骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP）受體（ALK2，ALK3和ALK6）。此外，最近，Dorsomorphin已顯示出通過不依賴AMPK抑制作用的Akt / mTOR途徑阻斷，在癌細胞中誘導(dǎo)保護性自噬。
2683	鹽酸洛哌丁胺	洛哌丁胺是一種止瀉藥，可作為非選擇性的Ca?2通道阻滯劑，在納摩爾濃度（Ki = 2 nM）下，洛哌丁胺與μ阿片受體結(jié)合，也可作為獨立于mTOR的自噬增強劑。
B1977-500	Rasfonin	Rasfonin是從Talaromyces sp中分離的，它是ras依賴性細胞中的選擇性凋亡誘導(dǎo)劑，Rasfonin誘導(dǎo)自噬并伴隨Akt磷酸化的上調(diào)。
1827-10	Rottlerin	Rottlerin最初報道為是對PKCδ具有選擇性的蛋白激酶C同工型抑制劑，然而，最近的研究表明，Rottlerin在體外不能阻斷PKCδ的活性，但能阻斷其他激酶和非激酶蛋白，并能高效激活多個Ca 2+敏感的K +通道，通過抑制mTORC1誘導(dǎo)自噬。
9580-5	SBI-0206965	SBI-0206965是選擇性的，細胞滲透性的自噬激酶ULK1抑制劑，它抑制ULK1激酶IC 50為108 nM，抑制ULK2 IC 50為711 nM。SBI-0206965通過抑制細胞中ULK1介導(dǎo)的磷酸化事件，調(diào)節(jié)自噬和細胞存活。SBI-0206965與雷帕霉素（mTOR）抑制劑的機制靶標極大地協(xié)同作用，可以殺死腫瘤細胞。
1865-5	SMER28	SMER28是一種細胞滲透性物質(zhì)，獨立于mTOR的機制，充當(dāng)自噬的正調(diào)節(jié)劑，SMER28增加自噬體的合成并增強模型自噬底物如A53Tα-突觸核蛋白和突變亨廷頓蛋白片段的清除，它在亨廷頓舞蹈病（HD）的果蠅模型中也具有保護作用。
2258-5	黃腐酚	黃腐酚是一種細胞滲透性的，生物活性類黃酮抗氧化劑，與含valosin蛋白的蛋白質(zhì)（VCP）的N末端結(jié)構(gòu)域結(jié)合，該蛋白質(zhì)是自噬小體成熟的必需蛋白質(zhì)。黃腐酚會抑制VCP的功能，從而損害自噬體的成熟并導(dǎo)致微管相關(guān)蛋白1輕鏈3-II（LC3-II）的積累。