PD-1（程序性死亡受體1）由日本學者本庶佑（Honjo）團隊于1992年發(fā)現(xiàn)，屬于免疫球蛋白超家族成員，其表達與細胞凋亡調控密切相關。研究顯示，PD-1通過與配體PD-L1/PD-L2結合形成免疫抑制信號通路，調控T細胞活化閾值以防止自身免疫反應。PD-1基因缺陷小鼠出現(xiàn)抗體分泌亢進及自發(fā)性自身免疫病（如腎炎、關節(jié)炎），證實該分子對免疫穩(wěn)態(tài)的調控作用。

腫瘤細胞通過高表達PD-L1與T細胞PD-1結合，抑制T細胞功能并形成免疫抑制微環(huán)境，這是腫瘤免疫逃逸的核心機制。針對該通路的PD-1/PD-L1抑制劑可阻斷免疫負調控，恢復T細胞抗腫瘤活性，目前已成為黑色素瘤、非小細胞肺癌等實體瘤的一線免疫治療手段。

一、推薦的腹腔注射方案

1. 推薦劑量范圍（下方內容僅供參考，需根據實驗情況進行優(yōu)化）

*實驗抗體最佳給藥劑量與頻率需依據實驗條件調整，包括宿主品系、疾病模型、干預周期、靶組織特性及抗原表達水平等參數(shù)差異。建議優(yōu)先查閱目標抗體的產品說明書，參考同類實驗系統(tǒng)的已發(fā)表數(shù)據作為基準參數(shù)；在此基礎上開展系統(tǒng)性劑量梯度與給藥頻次優(yōu)化實驗，建立符合特定研究需求的精準給藥方案。

2. 注射體積（Volume）

3. 注射頻率

二、關鍵操作規(guī)范與優(yōu)化建議

1. 溶劑與穩(wěn)定性控制

·緩沖液要求：優(yōu)先使用無菌的pH 7.2 PBS緩沖液，避免抗體聚集

·禁用溶劑：禁止使用含內毒素溶劑（所有研究默認無菌處理）

·濃度配置：推薦1–2 ug/uL（如200 ug/100–200 uL）以平衡滲透壓與分布效率

2. 體積安全閾值

·單次極限：≤10 mL/kg（100 uL/20 g小鼠）

·保守建議：≤5 mL/kg（100 uL/20 g小鼠），避免腹腔壓力驟升

3. 聯(lián)合治療策略

三、毒性監(jiān)測與對照設置

1. 免疫相關不良反應（irAE），常見癥狀：

? 體重下降＞20%

? 腸道菌群紊亂

2. 必需對照組

四、特殊模型注意事項

1. 小鼠體重差異調整

? 幼鼠（＜15 g） ：按10 mg/kg折算劑量（如10 g小鼠注射100 μg）

? 肥胖模型：按 瘦體重（Lean Body Mass） 計算，避免過高劑量

2. 腫瘤類型特異性調整

? 肝癌伴肝硬化：劑量降至150 μg/次，避免肝功能惡化

? 胰腺癌（低免疫浸潤）：增加局部治療（如氧微囊）以增強抗體滲透

五、方案總結表

* 操作Tip：

取200 ug RMP1-14抗體，溶于200 uL PBS緩沖液，22–25 g小鼠，45°角左下腹進針，注射速度≤50 uL/s（避免臟器損傷），首次給藥后48 h監(jiān)測體重，下降＞15%時劑量調整為150 ug/次。

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