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Lifesensors:多聚泛素化檢測

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2025-03-27     
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泛素化——細胞命運的“分子開關”  

蛋白質(zhì)泛素化(Ubiquitination)是調(diào)控細胞功能的核心翻譯后修飾機制之一。通過泛素分子與靶蛋白的共價結(jié)合,細胞能夠精確控制蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性、定位及相互作用,進而影響細胞周期、DNA修復、免疫應答等關鍵生命活動。其中,多聚泛素化鏈的類型(如K48、K63等)直接決定了蛋白質(zhì)的命運——K48鏈通常標記蛋白質(zhì)通過蛋白酶體降解,而K63鏈則參與信號轉(zhuǎn)導和炎癥反應。

然而,傳統(tǒng)泛素化檢測方法(如免疫共沉淀、Western Blot)面臨諸多挑戰(zhàn):

1、低靈敏度:難以捕獲低豐度泛素化蛋白;

2、缺乏特異性:無法區(qū)分泛素鏈類型(如K48 vs. K63);

3、操作繁瑣:耗時數(shù)天且依賴經(jīng)驗。

針對這些痛點,Lifesensors憑借20余年泛素化研究經(jīng)驗,推出UbiTest?與UbiQuant?系列試劑盒,為科研與藥物開發(fā)提供一站式解決方案。

 

 使用場景:從基礎研究到轉(zhuǎn)化醫(yī)學的全覆蓋  

1、癌癥研究與靶向治療開發(fā)

K48多聚泛素化異常與腫瘤抑制蛋白(如p53)的降解密切相關,而K63鏈則驅(qū)動NF-kB通路的過度激活。使用K48/K63鏈特異性UbiTest試劑盒(UM-0414M-1000/UM-0413M-1000),可精準篩選致癌性泛素化靶點,加速小分子抑制劑開發(fā)。

2、神經(jīng)退行性疾病機制解析

阿爾茨海默病中,Tau蛋白的異常泛素化導致神經(jīng)纖維纏結(jié)。UbiQuant? S Kit(UE-0103-0096)支持靶蛋白泛素化的絕對定量,為疾病標志物發(fā)現(xiàn)提供數(shù)據(jù)支撐。

3、藥物毒理學評估

藥物誘導的肝毒性常伴隨細胞周期蛋白的泛素化失調(diào)。通過UbiQuant? Kit(UE-0101-0096)快速檢測總泛素化水平變化,可高效評估化合物安全性。

 

 產(chǎn)品優(yōu)勢:為何選擇Lifesensors?  

1、特異性與靈敏度雙重突破

- UbiTest磁珠TUBE洗脫試劑盒(UM-0411M-1000)采用串聯(lián)泛素結(jié)合實體(TUBE)技術,通過高親和力泛素結(jié)合域捕獲多聚泛素化蛋白,靈敏度較傳統(tǒng)抗體提升10倍(如圖2)。

- K48/K63鏈特異性試劑盒基于專利抗體,可排除其他泛素鏈類型(如K11、K29)干擾,特異性>95%。

2、“一步法”操作,省時省力

從樣本裂解到泛素化蛋白富集僅需3小時,無需蛋白酶體抑制劑預處理,減少實驗變量。

3、兼容性與擴展性兼具

- 適配哺乳動物細胞、組織樣本及體外泛素化反應體系;

- 下游可銜接質(zhì)譜、Western Blot或ELISA,滿足多層次分析需求。

 

 核心產(chǎn)品詳解  

Lifesensors.png

1、UbiTest?磁珠TUBE洗脫試劑盒系列

- 通用型檢測(UM-0411M-1000):適用于未知泛素鏈類型的初篩,可同時捕獲K48、K63及其他類型多聚泛素化蛋白。

- 通用型檢測(UM-0412M-1000):適用于未知泛素鏈類型的初篩,可分別分析蛋白質(zhì)被K48/K63多聚泛素化。

- K48鏈特異性試劑盒(UM-0414M-1000):專為蛋白質(zhì)降解研究設計,直接關聯(lián)蛋白酶體通路活性。

- K63鏈特異性試劑盒(UM-0413M-1000):聚焦炎癥與應激信號,解析TLR/IL-1R等通路調(diào)控機制。

Lifesensors-1.png

Jurkat細胞中蛋白質(zhì)的泛素化分析。

(A) DUB處理后,A、B、C蛋白信號升高,提示其多泛素化。(B)泛素免疫印跡顯示TUBE下拉樣品中多泛素被DUB完全消化。用硼替佐米(BTZ)處理Jurkat細胞2小時。細胞在RIPA緩沖液中裂解,緩沖液中添加蛋白酶雞尾酒抑制劑(Calbiochem, PIC Set V), 50?M PR619 (LifeSensors Cat.# SI9619),和 5 mM o-phenanthroline (LifeSensors Cat.# SI9649)。

貨號規(guī)格產(chǎn)品名稱
LSS-UM-0411-300010 pull-downsUbiTest Buffers Only
LSS-UM-0411M-100010 pull-downsUbiTest Magnetic TUBE Elution Kit
LSS-UM-0411-100010 pull-downsUbiTest Agarose-TUBE Elution Kit
LSS-UM-0412-100010 pull-downsLinkage Profiling UbiTest - Agarose TUBE Elution Kit
LSS-UM-0413M-100010 pull-downsK63 Linkage Specific UbiTest - Magnetic TUBE Elution Kit
LSS-UM-0414-480010 pull-downsK48 Linkage Specific UbiTest -Agarose TUBE Elution Kit
LSS-UM-0414M-100010 pull-downsK48 Linkage-Specific UbiTest - Magnetic TUBE Elution Kit
LSS-UM-0412M-100010 pull-downsLinkage-Specific UbiTest - Magnetic TUBE Elution Kit
LSS-UM-0413-630010 pull-downsK63 Linkage Specific UbiTest - Agarose TUBE Elution Kit
LSS-UM-0420-10001 KitUbiquitin Mass Spectrometry Kit


2、UbiQuant?系列:從全局到靶向的定量革命 

- UbiQuant? Kit(UE-0101-0096):通過化學發(fā)光法檢測總泛素化水平,5μL樣本即可完成分析,適用于高通量篩選(如圖3)。

Lifesensors-2.png

- UbiQuant? S Kit(UE-0103-0096):結(jié)合免疫磁珠與熒光探針,實現(xiàn)特定靶蛋白(如EGFR、p53)的泛素化絕對定量,CV值<8%。

艾美捷貨號規(guī)格產(chǎn)品名稱
LSS-UE-0101-00961 PlateUbiQuant? Kit
LSS-UE-0103-00961 KitUbiQuant? S Kit
LSS-UE-0901-00961 PlateUbiQuant? Plate
LSS-UE-0901-03841 PlateUbiQuant? Plate
LSS-UE-0903-00961 PlateUbiQuant? S Plate
LSS-UE-0903-03841 PlateUbiQuant? S Plate
LSS-UE-0905-00961 PlateUbiQuant? Ultra Plate
LSS-UE-0905-03841 PlateUbiQuant? Ultra Plate


如何開始您的泛素化研究? 

1、明確需求:選擇泛素化類型(總泛素化/多聚鏈特異性)與檢測目標(全局/靶蛋白);

2、匹配試劑盒:參考產(chǎn)品詳情,或聯(lián)系Lifesensors/艾美捷技術支持團隊獲取個性化方案;

3、快速上手:訪問官網(wǎng)下載詳細Protocol,首次實驗成功率>90%。

 

泛素化研究正從“定性描述”邁向“定量解析”時代。Lifesensors以創(chuàng)新技術為核心,幫助研究者突破檢測瓶頸,加速從機制探索到臨床轉(zhuǎn)化的每一步。立即聯(lián)系艾美捷科技訂購試劑盒,解鎖您的下一個重大發(fā)現(xiàn)!

 


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