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1968年,Arne Boyum博士報(bào)告了一種從人血中分離單核細(xì)胞的簡單有效方法。35多年來,一種名為LymphoprepTM的商業(yè)介質(zhì)被廣泛用于分離這些細(xì)胞。
單核細(xì)胞(單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞)的浮力密度低于紅細(xì)胞和多形核(PMN)白細(xì)胞(粒細(xì)胞)。絕大多數(shù)單核細(xì)胞的密度低于1.077 g/ml。因此,這些細(xì)胞可以通過在密度為1.077 g/ml的等滲介質(zhì)上離心來分離,這使得紅細(xì)胞和PMN可以通過介質(zhì)沉降,而將單核細(xì)胞保留在樣品/介質(zhì)界面。
所述方法是快速、簡單、可靠的,并且對正常人和患者的血液樣本都能得到極好的結(jié)果。
為了獲得最大的產(chǎn)量,重要的是在將血液樣本應(yīng)用于梯度之前,先用生理鹽水按1:1稀釋。單核細(xì)胞懸浮液中紅細(xì)胞的污染通常在總細(xì)胞數(shù)的3-10%之間。
在強(qiáng)烈的免疫抑制治療期間,一些未成熟的PMN可能會(huì)與淋巴細(xì)胞一起沉積。當(dāng)使用肝素化血液時(shí),必須去除大部分血小板,以避免在細(xì)胞毒性測試中產(chǎn)生抑制。每批Lymphoprep都使用特定的LAL測試檢查內(nèi)毒素水平。目標(biāo)是提供內(nèi)毒素水平低于或等于0.13 IU/ml的批次。
對于生產(chǎn)的每批產(chǎn)品,可以根據(jù)要求提供顯示實(shí)際密度、滲透壓和內(nèi)毒素值的分析證書。我們還根據(jù)Ph.Eur.聲稱無菌。
Lymphoprep的制造、包裝和放行符合GMP和ISO 13485的規(guī)定。
LymphoprepTM可用于制備純淋巴細(xì)胞懸浮液,用于組織分型、抗淋巴細(xì)胞血清和免疫學(xué)研究。Thorsby和Brattelie在制備用于細(xì)胞毒性測試和淋巴細(xì)胞培養(yǎng)的純淋巴細(xì)胞懸浮液時(shí),僅對這種技術(shù)進(jìn)行了輕微的修改。

艾美捷PROGEN-LymphoPrep (6x500 ml):
貨號(hào) 1858-6
數(shù)量 6瓶 x 500毫升
預(yù)期用途 僅供研究使用
產(chǎn)品描述 Lymphoprep?是一種現(xiàn)成的、無菌的、經(jīng)過內(nèi)毒素檢測的溶液,用于分離純淋巴細(xì)胞懸浮液。該溶液含有三碘酸鈉和多糖。
密度 1.077 ± 0.001 克/毫升
成分 9.1% (w/v) 三碘酸鈉,5.7% (w/v) 多糖
滲透壓 290 ± 15 mOsm
內(nèi)毒素 < 1.0 歐盟單位/毫升
穩(wěn)定性與儲(chǔ)存 Lymphoprep?在保持無菌并避免光照的條件下可穩(wěn)定保存3年。長時(shí)間直接暴露在陽光下會(huì)導(dǎo)致三碘酸鈉分子釋放碘。在日常使用該溶液時(shí),這種影響是可以忽略不計(jì)的。Lymphoprep?應(yīng)儲(chǔ)存在+4°C至+30°C的溫度范圍內(nèi)。
PROGEN-LymphoPrep (6x500 ml)主要特點(diǎn):
現(xiàn)成的、無菌且經(jīng)過內(nèi)毒素檢測的溶液
高效的密度梯度介質(zhì),用于從稀釋血液中純化人類單核細(xì)胞(單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞)
一個(gè)訂單單位包含6瓶x500毫升的Lymphoprep?。
文獻(xiàn)參考:
Hust, M. et al. Enrichment of open reading frames presented on bacteriophage M13 using Hyperphage. Biotechniques 41, 335–342 (2006).
PROGEN,體外診斷試劑的制造商和供應(yīng)商。 主要產(chǎn)品線: 經(jīng)過質(zhì)檢驗(yàn)證的抗體、體外診斷產(chǎn)品、抗體噬菌體展示技術(shù)、密度梯度分離液和AAV(腺相關(guān)病毒)檢測試劑盒等。
艾美捷科技是PROGEN的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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