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葡萄糖代謝是將葡萄糖轉(zhuǎn)化為能量的過(guò)程,是大多數(shù)生物體中能量供應(yīng)的主要來(lái)源,葡萄糖攝入細(xì)胞是葡萄糖代謝的首個(gè)限速步驟, 該過(guò)程受到嚴(yán)密的調(diào)控。目前的研究顯示,葡萄糖攝取異常跟多種疾病相關(guān),例如在許多癌癥細(xì)胞中, 表現(xiàn)有葡萄糖攝取的上調(diào), 從而表現(xiàn)出很高的有氧糖酵解比率;胰島素耐受細(xì)胞在遇到胰島素刺激時(shí), 會(huì)出現(xiàn)葡萄糖攝入減弱。因此葡萄糖攝取的檢測(cè)成為許多細(xì)胞代謝相關(guān)疾病中的一個(gè)重要的指標(biāo)。

通過(guò)測(cè)量組織和細(xì)胞中葡萄糖類似物2-脫氧葡萄糖(2-DG)的攝取已被廣泛認(rèn)為是一種測(cè)定葡萄糖攝取的可靠方法,可用來(lái)評(píng)估萄糖的攝取量以及研究葡萄糖代謝的調(diào)節(jié)和胰島素抵抗的機(jī)制。通常我們是通過(guò)使用同位素氚或C14標(biāo)記的非代謝型的2-DG來(lái)檢測(cè)2-DG的攝入量。然而,同位素標(biāo)記探針的使用較為昂貴的,并且檢測(cè)時(shí)需要繁瑣的特殊處理程序。
今天給大家介紹一款艾美捷科技代理品牌AAT 的Screen Quest?比色法葡萄糖攝取分析試劑盒(貨號(hào):36503),這款試劑盒可采取非放射性分析分析的方法對(duì)組織或培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行葡萄糖攝取分析。在檢測(cè)過(guò)程中,2-DG被葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白吸收,并代謝成2-DG-6-磷酸(2-DG6P),不能代謝的2-DG6P在細(xì)胞中積累,積累的量與細(xì)胞的葡萄糖攝取成正比,累積的2-DG6P被酶促氧化并產(chǎn)生NADPH,然后通過(guò)顯色NADPH探針特異性檢測(cè)NADPH,通過(guò)酶標(biāo)儀讀取570nm-610nm的OD值信號(hào)即可反應(yīng)2-DG的攝取情況。
檢測(cè)結(jié)果展示:
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| 在分化的3T3-L1脂肪細(xì)胞和3T3-L1成纖維細(xì)胞中對(duì)2DG攝取進(jìn)行檢測(cè)。使用SpectraMax(Molecular Devices)微孔板讀板器,在黑孔/透明底細(xì)胞培養(yǎng)Poly-D賴氨酸板子中,使用Screen Quest?比色法葡萄糖攝取檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。 A:陰性對(duì)照,無(wú)胰島素,無(wú)2-DG處理. B:在無(wú)胰島素的情況下2DG攝取. C:在1mM胰島素存在下2DG攝取. D:在1mM胰島素和200 mM促視黃素存在下2DG攝取. E:在1mM胰島素和5mM D-葡萄糖存在下2DG攝取. |
除了上面給大家介紹的比色法葡萄糖攝取試劑盒,我們還有2-NBDG葡萄糖攝取檢測(cè)試劑盒(貨號(hào):23500):
2-NBDG是一種熒光標(biāo)記的葡萄糖示蹤劑,2-NBDG通過(guò)與葡萄糖相同的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(GLUT)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞中。一旦2-NBDG被細(xì)胞攝取,它就在C-6位置發(fā)生磷酸化,得到2-NBDG-6-磷酸,它很好地保留在細(xì)胞內(nèi)。與其他葡萄糖示蹤劑(例如2-DG或FDG)相比,2-NBDG可實(shí)現(xiàn)在單細(xì)胞水平上具有高時(shí)間和空間分辨率的2-NBDG的原位測(cè)量。(適用于熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測(cè))

細(xì)胞中2-NBDG攝取的測(cè)定原理: 一旦2-NBDG被細(xì)胞吸收,它會(huì)在C-6位置進(jìn)行磷酸化,生成2-NBDG-6-磷酸鹽,該磷酸鹽會(huì)很好地保留在細(xì)胞內(nèi), 熒光強(qiáng)度與細(xì)胞葡萄糖攝取活性成正比。
相關(guān)產(chǎn)品推薦:
| 產(chǎn)品名稱(貨號(hào)) | 參考結(jié)果 |
| 2-NBDG 葡萄糖攝取檢測(cè)試劑盒(23500) |
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| Screen Quest? 熒光法葡萄糖吸收檢測(cè)試劑盒(36500) |
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葡萄糖攝取試劑盒引用文獻(xiàn)賞析:
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| 36503引文:miR-143-3p functions as a tumor suppressor by targeting HK2 in neuroblastomas Authors: Cen, Yuanhua and Xu, Li and Huang, Saihu and Zhuang, Songqiang Journal: Int J Clin Exp Med (2019): 8450--8460 |
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| 36500引文:KLF10 Deficiency in CD4+ T Cells Triggers Obesity, Insulin Resistance, and Fatty Liver Authors: Wara, Akm Khyrul and Wang, Shijia and Wu, Chun and Fang, Fang and Haemmig, Stefan and Weber, Brittany N and Aydogan, Ceren O and Tesmenitsky, Yevgenia and Aliakbarian, Hassan and Hawse, John R and others Journal: Cell Reports (2020): 108550 |
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| 36500引文:miR-210 in Exosomes Derived from Macrophages under High Glucose Promotes Mouse Diabetic Obesity Pathogenesis by Suppressing NDUFA4 Expression Authors: Tian, Feng and Tang, Ping and Sun, Zhilian and Zhang, Ruifen and Zhu, Danhua and He, Junying and Liao, Jixing and Wan, Qinghua and Shen, Jie Journal: Journal of Diabetes Research (2020) |
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| 36500引文:Panax notoginseng saponins alleviate skeletal muscle insulin resistance by regulating the IRS 1-PI 3K-AKT signaling pathway and GLUT 4 expression Authors: Guo, Xuan and Sun, Wen and Luo, Guangbin and Wu, Lili and Xu, Guangyuan and Hou, Dan and Hou, Yi and Guo, Xiangyu and Mu, Xiaohong and Qin, Lingling and others Journal: FEBS open bio (2019) |
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艾美捷科技與國(guó)內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商優(yōu)保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多國(guó)際知名品牌的中國(guó)總代理或一級(jí)代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abbexa、Abnova、Agrisera、Anogen、Biosensis、Biovision、BioVendor、Caisson Labs、Cell Biolabs、Cytoskeleton、Demeditec、Duchefa、Epigentek、Equitech-Bio、EXBio、Fitzgerald、GeneCopoeia、Hycult Biotech、ImmunoReagents、ImmunoStep、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、Lumiprobe、Mabtech、Matreya、Norgen Biotek、Origene、ProImmune、ProSpec、ScyTek、Solis BioDyne、SouthernBiotech、StressMarq、SySy、US Biological、TRC等,可以在短時(shí)間內(nèi)為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。
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