葡萄糖攝取有多種方法和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，取決于細(xì)胞類型的代謝需求以及葡萄糖的可用性。有超過(guò)十種不同的易化擴(kuò)散葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，它們可以在不消耗ATP的情況下，將葡萄糖沿著濃度梯度運(yùn)輸。在腎臟中，次級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸被用于逆濃度梯度攝取葡萄糖，以確保尿液中幾乎不排出葡萄糖。

BioAssaySystems的熒光細(xì)胞基礎(chǔ)葡萄糖攝取測(cè)定法使用2-脫氧葡萄糖（2-DG），這是一種廣泛使用的葡萄糖類似物，因?yàn)樗梢员黄咸烟寝D(zhuǎn)運(yùn)蛋白攝取，并被內(nèi)源性己糖激酶代謝為2-脫氧葡萄糖-6-磷酸（2-DG6P）。2-DG6P會(huì)在細(xì)胞內(nèi)積累，因?yàn)樗皇橇姿崞咸烟钱悩?gòu)酶（糖酵解的下一步）的合適底物。細(xì)胞被裂解后，加入過(guò)量的NADP和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PDH），以代謝2-DG6P并生成等摩爾量的NADPH。然后通過(guò)G6PDH循環(huán)反應(yīng)測(cè)量NADPH，以放大信號(hào)并產(chǎn)生可測(cè)量的熒光信號(hào)，激發(fā)波長(zhǎng)/發(fā)射波長(zhǎng)為530/585nm，與2-DG6P的濃度成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品【干冰】EnzyFluo 葡萄糖攝取測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

-安全。不使用放射性物質(zhì)。

-靈敏且準(zhǔn)確。檢測(cè)限為0.1uM，線性范圍可達(dá)5uM2-DG6P。

-簡(jiǎn)單便捷。可作為中通量細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)測(cè)定法實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。

應(yīng)用

-測(cè)定完整細(xì)胞中的葡萄糖攝取。

-評(píng)估配體或藥物對(duì)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)的影響。

試劑盒組成

-測(cè)定緩沖液：10mL

-G6P試劑：1.5mL

-酶A：120uL

-酶B：120uL

-2-DG底物：1.2mL

-NADP：120uL

-2-DG6P標(biāo)準(zhǔn)品：120uL

-探針：750uL

-NADP/NADPH提取緩沖液：各12mL

儲(chǔ)存條件

-將所有試劑儲(chǔ)存于-20°C。自收到之日起有效期為6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

-試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)安全措施。詳細(xì)信息請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表。

PANC-1細(xì)胞中的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)測(cè)定實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞按照協(xié)議進(jìn)行接種、饑餓和處理。左側(cè)：在有無(wú)1mM苯甲酸的存在下，PANC-1細(xì)胞的梯度實(shí)驗(yàn)。右側(cè)：苯甲酸對(duì)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)的抑制曲線。PANC-1細(xì)胞以每孔10,000個(gè)細(xì)胞的密度進(jìn)行接種。

文獻(xiàn)參考：

1. Liu, Meihan, et al (2019). Activation of AMPK by metformin promotes renal cancer cell proliferation under glucose deprivation through its interaction with PKM2. International Journal of Biological Sciences 15.3:617-627.

2. Park, Seong-Hoon, et al(2016). SIRT2-mediated deacetylation and tetramerization of pyruvate kinase directs glycolysis and tumor growth.Cancer research 76.13: 3802-3812.

3. Tunduguru, Ragadeepthi (2016). Regulation of skeletal muscle insulin sensitivity by PAK1. Dissertation. Assay: Glucose uptake in rat cells. 

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。