血漿/血清，外泌體總RNA提取試劑盒-升級(jí)款基于自主研發(fā)的均質(zhì)液體磁珠，可特異性捕獲外泌體，而無(wú)需吸附雜質(zhì)，實(shí)現(xiàn)外泌體總RNA的高純度和高回收率操作、高純度和高回收率，使其特別適合從血漿和血清。提取的外泌體RNA可用于逆轉(zhuǎn)錄、RT-PCR、RT-qPCR、RIP、NGS和其他研究應(yīng)用。

艾美捷血漿/血清，外泌體總RNA提取試劑盒-升級(jí)款：

編號(hào)：A-EXO009

規(guī)格：50T

儲(chǔ)存：4°C（12個(gè)月）

ExoMag外泌體磁珠加強(qiáng)版 5毫升 4°C

提取緩沖液 50毫升 4°C

溶液A 2 x 125毫升 4°C

DEPC處理水 1毫升 4°C

1.5毫升無(wú)核酸酶管 50支 室溫

材料需自備但未提供：

高速冷凍離心機(jī)

平臺(tái)搖床

1.5毫升離心管

磁力架

冰盒

氯仿、異丙醇、75%乙醇等

樣本前處理：

1. 細(xì)胞去除：在4°C下，以300 g離心樣本5分鐘。將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中。

對(duì)于無(wú)細(xì)胞樣本，可以跳過(guò)此步驟。

2. 細(xì)胞和細(xì)胞碎片去除：在4°C下，以2000 g離心樣本10分鐘。將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中。

3. 大顆粒去除：將第二步得到的上清液在4°C下，以14000 g離心30分鐘。將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中。

外泌體富集：

1. 將100微升的ExoMag外泌體磁珠加強(qiáng)版轉(zhuǎn)移到1.5毫升離心管中，并將其放置在磁力架上30秒。丟棄磁珠保護(hù)溶液。

2. 向上述ExoMag外泌體磁珠加強(qiáng)版中加入500微升的預(yù)處理樣本（如果處理的樣本體積小于500微升，只需使用溶液A將樣本體積補(bǔ)足至500微升）。將管固定在平臺(tái)搖床上，在室溫下以17轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速孵育30分鐘。

在某些樣本中，ExoMag外泌體磁珠加強(qiáng)版在與外泌體結(jié)合過(guò)程中可能會(huì)聚集在一起。然而，這種聚集不影響分離效率，因此您可以信心滿滿地繼續(xù)使用它們。

3. 將上述離心管放置在磁力架上，靜置30秒，然后丟棄上清液。

4. 加入1毫升溶液A，通過(guò)翻轉(zhuǎn)管子混合，然后放置在磁力架上，靜置30秒，然后丟棄上清液。

5. 再重復(fù)第四步兩次，保留ExoMag外泌體磁珠加強(qiáng)版。

重要注意事項(xiàng)：

提取緩沖液中含有苯酚，苯酚具有毒性和腐蝕性。吸入、皮膚接觸或吞食可能導(dǎo)致中毒、燒傷和其他身體傷害。使用時(shí)應(yīng)穿戴實(shí)驗(yàn)室大衣、手套、護(hù)目鏡和口罩等防護(hù)裝備。如果不慎接觸到眼睛，應(yīng)立即用大量水沖洗并尋求醫(yī)療幫助。

RNA提取應(yīng)在冰上進(jìn)行。

穿戴實(shí)驗(yàn)室服裝和一次性手套，以避免RNase污染。

采取措施防止RNA提取中使用的耗材受到RNase污染。應(yīng)使用無(wú)RNase水配制溶液。

準(zhǔn)備氯仿、異丙醇（新開(kāi)封或?qū)Ｓ糜赗NA提取）、75%乙醇（用DEPC處理水配制）和無(wú)RNase水。

RNA的半衰期相對(duì)較短，容易降解。建議提取后立即進(jìn)行進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。

為了您的安全和健康，在操作過(guò)程中穿戴實(shí)驗(yàn)室服裝和一次性手套。