LAP是一種水溶性、細(xì)胞相容的光引發(fā)劑，用于水凝膠或生物墨水的聚合。由于其增加的水溶性、在365納米光下增加的聚合速率，以及在400納米處的吸收能力，允許使用可見光進(jìn)行聚合，這種光引發(fā)劑比Irgacure 2959更適合生物應(yīng)用。改進(jìn)的聚合動(dòng)力學(xué)使細(xì)胞包埋能夠在較低的引發(fā)劑濃度和更長的波長光下進(jìn)行，這已被證明可以減少引發(fā)劑毒性并增加細(xì)胞存活率。

LAP光引發(fā)劑 (405nm)，非無菌，500mg被認(rèn)為是非無菌的。建議向您的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中添加抗生素，或進(jìn)行無菌過濾。進(jìn)行無菌過濾時(shí)，重新懸浮所需數(shù)量的LAP，并通過0.2微米的小按鈕過濾器過濾。請?jiān)?周內(nèi)使用無菌光引發(fā)劑。此產(chǎn)品附帶500毫克的干粉。

LAP光引發(fā)劑 (405nm)，非無菌，500mg存儲/穩(wěn)定性：

產(chǎn)品裝在凝膠包中運(yùn)輸。將產(chǎn)品存放在2-8°C。稱量所需量的粉末進(jìn)行溶解。一旦溶解后，請?jiān)?周內(nèi)使用。

未溶解的干粉（非溶解的）在2-8°C下穩(wěn)定存放超過1年。

艾美捷釕光引發(fā)劑/ Ruthenium Photoinitiator（ABM-5248-1KIT）：

釕可見光光交聯(lián)套件非常適合組織工程、細(xì)胞培養(yǎng)和生物打印，這些應(yīng)用中需要調(diào)節(jié)基質(zhì)的機(jī)械性能。該套件提供的光引發(fā)劑足夠用于>200毫升的生物墨水/水凝膠（按照推薦的濃度）。

釕是一種利用可見光光交聯(lián)（400-450納米）來共價(jià)交聯(lián)游離酪氨酸和丙烯酸基團(tuán)的光引發(fā)劑。

釕光引發(fā)劑已在I型膠原、明膠、絲素蛋白、甲基丙烯酰化透明質(zhì)酸、甲基丙烯酰化明膠、甲基丙烯酰化I型膠原和PEGDA上進(jìn)行了測試。

釕是水溶性的，并且具有更好的細(xì)胞相容性和交聯(lián)效率。

使用釕將可見光強(qiáng)度從3-100 mW/cm?增加并沒有顯著降低細(xì)胞存活率至90%以下。

將釕濃度增加10倍（10x）并沒有降低細(xì)胞存活率至90%以下。

釕呈紅色/黃色/橙色，并會改變您的溶液、水凝膠或打印構(gòu)件的顏色。

這個(gè)釕可見光光交聯(lián)套件被認(rèn)為是非無菌的。建議向您的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中添加抗生素，或進(jìn)行無菌過濾。進(jìn)行無菌過濾時(shí)，分別重新懸浮整個(gè)體積的釕和過硫酸鈉，并通過小的0.2微米按鈕過濾器（分別）過濾。請?jiān)?周內(nèi)使用無菌光引發(fā)劑。

釕可見光光交聯(lián)套件由兩個(gè)組分組成，如表1所示。

Item Catalog Number Package Size

Ruthenium Photoinitiator #5246 200 mg

Sodium Persulfate Photoinitiator #5247 1 gram

存儲/穩(wěn)定性：

產(chǎn)品在常溫下運(yùn)輸。將套件存放在室溫下。稱量所需量的粉末進(jìn)行溶解。一旦溶解后，請?jiān)?周內(nèi)使用釕和過硫酸鈉。

未溶解的干粉（非溶解的）在室溫下穩(wěn)定存放超過1年。

釕光引發(fā)劑使用說明：

1. 計(jì)算所需的水凝膠或生物墨水（ECM + 細(xì)胞）的體積。

2. 將所需體積乘以0.02。這是您將添加到預(yù)水凝膠溶液中的釕和過硫酸鈉（每種）的數(shù)量。

3. 以37.4 mg/mL的濃度在水中或1X PBS中溶解所需的釕。

4. 以119 mg/mL的濃度在水中或1X PBS中溶解過硫酸鈉。

5. 將計(jì)算出的體積（步驟2）的釕添加到您的預(yù)水凝膠溶液中，并徹底混合。

6. 將計(jì)算出的體積（步驟2）的過硫酸鈉添加到您的預(yù)水凝膠溶液中，并徹底混合。

注意事項(xiàng)：

在添加到預(yù)水凝膠之前，不要將釕和過硫酸鈉混合在一起。您會得到一個(gè)快速的氧化還原反應(yīng)，它們會立即沉淀。

7. 如果需要，添加細(xì)胞。

8. 在400-450nm的波長下進(jìn)行光交聯(lián)。最初的建議是50 mW/cm?超過3分鐘以保持形狀/水凝膠保真度。您可以調(diào)整光引發(fā)劑濃度、光強(qiáng)度和光交聯(lián)時(shí)間，以定制最終水凝膠的硬度。

附加說明：

如果使用中和的I型膠原，您可以允許膠原在37°C下聚合形成水凝膠，然后進(jìn)行光交聯(lián)以進(jìn)一步交聯(lián)并調(diào)節(jié)凝膠硬度。

如何將釕與Lifeink? 200和3D生物打印一起使用：

1. 根據(jù)推薦的協(xié)議打印Lifeink? 200，進(jìn)入FRESH支撐漿料中。

2. 打印后，孵化打印物以熔化FRESH明膠支撐漿料。

3. 大約30分鐘后，用溫暖的細(xì)胞培養(yǎng)基替換熔化的明膠。

4. 例如，用移液管取出2 mL的熔化明膠，然后加入2 mL的培養(yǎng)基。重復(fù)此過程，直到移除明膠。

5. 準(zhǔn)備釕和過硫酸鈉的儲備溶液（在上述協(xié)議中找到）。

6. 將您的Lifeink? 200結(jié)構(gòu)漂浮著的培養(yǎng)基的總體積乘以2%，并在細(xì)胞培養(yǎng)基中直接添加等量的釕和過硫酸鈉（在您的結(jié)構(gòu)所在的相同盤子中）。

7. 使用可見光（400-450 nm）進(jìn)行光交聯(lián)，直到達(dá)到所需的交聯(lián)。

8. 如第3步中所做的，輕輕地用新鮮培養(yǎng)基替換培養(yǎng)基。