酶免疫測定法用于定量測定不同動(dòng)物物種和生物體液中的組胺。在樣品制備過程中，組胺被定量酰化。隨后的競爭性ELISA試劑盒使用微量滴定板格式。抗原與微量滴定板的固相結(jié)合。酰化標(biāo)準(zhǔn)品、對照品和樣品以及固相結(jié)合的分析物競爭固定數(shù)量的抗血清結(jié)合位點(diǎn)。在系統(tǒng)達(dá)到平衡后，通過洗滌去除游離抗原和游離抗原-抗血清復(fù)合物。以TMB為底物，通過抗兔IgG過氧化物酶偶聯(lián)物檢測與固相結(jié)合的抗體。在450nm下監(jiān)測反應(yīng)。未知樣品的定量是通過將其吸光度與用已知標(biāo)準(zhǔn)濃度制備的參考曲線進(jìn)行比較來實(shí)現(xiàn)的。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品組胺研究EIA(96孔)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

組胺研究EIA(96孔)注意事項(xiàng)、指南和警告：

(1) 此試劑盒僅供研究使用。用戶應(yīng)充分理解本協(xié)議以成功使用此試劑盒。只有隨試劑盒提供的測試說明是有效的，必須使用它來運(yùn)行檢測。只有通過嚴(yán)格和仔細(xì)遵循所提供的說明，才能獲得可靠的性能。

(2) 必須遵循良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范（GLP）的原則。

(3) 為減少接觸潛在有害物質(zhì)的風(fēng)險(xiǎn)，必要時(shí)請穿戴實(shí)驗(yàn)室外套、一次性手套和防護(hù)眼鏡。

(4) 所有試劑盒試劑和樣本在使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫，并輕輕但徹底地混合。避免試劑和樣本的反復(fù)凍融。

(5) 用于稀釋或重組的，請使用去離子水、蒸餾水或超純水。

(6) 微孔板包含可拆卸條帶。未使用的孔位必須在密封的箔袋中與干燥劑一起存放在2°C至8°C，并在使用提供的框架內(nèi)使用。

(7) 強(qiáng)烈推薦對樣本進(jìn)行雙重測定，以便能夠識別潛在的移液誤差。

(8) 一旦檢測開始，所有步驟都應(yīng)不間斷地完成。確保所需的試劑、材料和設(shè)備在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間準(zhǔn)備就緒。

(9) 孵化時(shí)間確實(shí)會影響結(jié)果。所有孔位應(yīng)以相同的順序和時(shí)間間隔處理。

(10) 為避免試劑交叉污染，請使用新的一次性移液管頭分配每種試劑、樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和對照品。

(11) 每次運(yùn)行都必須建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

(12) 每次運(yùn)行中都應(yīng)包括對照品，并且應(yīng)落在既定的置信限內(nèi)。置信限列在QC報(bào)告中。

(13) 不要在測試中混合不同批號的試劑盒組分，并且不要使用超出試劑盒標(biāo)簽上所示過期日期的試劑。

(14) 避免接觸含有0.25 M硫酸的停止溶液。它可能會引起皮膚刺激和灼傷。如果與眼睛或皮膚接觸，請立即用水沖洗。

(15) TMB底物對皮膚和粘膜有刺激性。如果可能接觸，請用大量水沖洗眼睛，用肥皂和大量水清洗皮膚。在使用前清洗受污染的物品。

(16) 有關(guān)試劑盒中包含的有害物質(zhì)的信息，請參考安全數(shù)據(jù)表（SDS）。該產(chǎn)品的安全數(shù)據(jù)表可直接在ALPCO的網(wǎng)站上獲取，也可應(yīng)要求提供。

(17) 試劑盒試劑必須被視為危險(xiǎn)廢物，并根據(jù)當(dāng)?shù)睾蛧乙?guī)定進(jìn)行處理。

(18) 如果試劑盒或其組分嚴(yán)重?fù)p壞，應(yīng)在收到試劑盒后7天內(nèi)通知ALPCO。嚴(yán)重?fù)p壞的單個(gè)組分不應(yīng)用于測試運(yùn)行。應(yīng)妥善存放，等待ALPCO的進(jìn)一步建議。

試驗(yàn)程序：

以下大鼠血漿樣本方案應(yīng)作為指導(dǎo)方針，適用于預(yù)期組胺濃度較高的動(dòng)物物種。在這種情況下，必須用稀釋劑（BA E-0041）對樣品進(jìn)行預(yù)稀釋。在預(yù)期濃度較低的情況下，不需要進(jìn)行樣品預(yù)稀釋。組胺研究ELISA在不同動(dòng)物物種中檢測到以下濃度：

使用前，讓所有試劑和樣品達(dá)到室溫，輕輕倒置，充分混合。建議重復(fù)測定。建議在使用前對微孔板的條帶進(jìn)行編號，以避免混淆。抗血清和酶綴合物的結(jié)合以及酶的活性是溫度依賴性的，如果不使用恒溫器，吸收值可能會有所不同。溫度越高，消光值越高。不同的孵育時(shí)間對吸收的影響相似。酶免疫測定的最佳溫度在20-25°C之間。如果發(fā)生溢出，請?jiān)?0分鐘內(nèi)使用設(shè)置為405nm的酰胺酶標(biāo)儀讀取孔中溶液的吸光度。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。