人胎盤催乳素ELISA是一種酶免疫測定法，用于定量測定血清中的人胎盤催乳素（hPL）。僅供研究使用。不適用于獨(dú)立程序

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品人胎盤催乳素（HPL）ELISA。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

人胎盤催乳素（HPL）ELISA檢測原理：

hPL ELISA試劑盒是基于上述原理的固相酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。微量滴定孔涂有針對(duì)hPL分子獨(dú)特抗原位點(diǎn)的單克隆[小鼠]抗體。將含有內(nèi)源性hPL的樣品等分試樣與酶偶聯(lián)物在包被孔中孵育，酶偶聯(lián)物是一種與辣根過氧化物酶偶聯(lián)的抗hPL抗體。孵育后，洗掉未結(jié)合的結(jié)合物。結(jié)合的過氧化物酶的量與樣品中hPL的濃度成正比。加入底物溶液后，顯色強(qiáng)度與樣品中hPL的濃度成正比。

檢測程序注意事項(xiàng)：手動(dòng)移液：建議每次檢測運(yùn)行不要使用超過32個(gè)孔。所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和對(duì)照品的移液應(yīng)在3分鐘內(nèi)完成。自動(dòng)移液：每次檢測運(yùn)行可以使用96孔的完整板。然而，建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和對(duì)照品的移液在3分鐘內(nèi)完成。每次運(yùn)行必須包括一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1. 在架子上固定所需數(shù)量的微孔板孔。

2. 使用新的一次性吸頭，向適當(dāng)?shù)目字蟹謩e加入10 ?L的標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品和預(yù)稀釋樣本。

3. 向每個(gè)孔中加入100 ?L的酶結(jié)合物。徹底混合10秒鐘。這一步完全混合非常重要。

4. 在室溫下孵化30分鐘。

5. 迅速搖動(dòng)孔內(nèi)液體。用蒸餾水（每個(gè)孔300 ?L）沖洗孔5次。在吸水紙上用力敲擊孔以去除殘留液滴。重要注意事項(xiàng)：洗滌程序的正確執(zhí)行對(duì)本檢測的靈敏度和精確度有很大影響！

6. 向每個(gè)孔中加入100 ?L的底物溶液。

7. 在室溫下孵化10分鐘。

8. 通過向每個(gè)孔中加入50 ?L的終止液來停止酶促反應(yīng)。

9. 使用微孔板讀取器，在450 ± 10 nm處測定每個(gè)孔的吸光度（OD）。建議在加入終止液后10分鐘內(nèi)讀取孔。

結(jié)果計(jì)算

1. 計(jì)算每組標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品和樣本的平均吸光度值。

2. 使用半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙，通過將每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的平均吸光度與其濃度繪制在圖表上，吸光度值在垂直（Y）軸上，濃度在水平（X）軸上，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3. 使用每個(gè)樣本的平均吸光度值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定相應(yīng)的濃度。

4. 自動(dòng)方法：使用說明書中的結(jié)果已使用4參數(shù)曲線擬合自動(dòng)計(jì)算。（首選4參數(shù)Rodbard或4參數(shù)Marquardt方法。）其他數(shù)據(jù)簡化功能可能會(huì)給出略有不同的結(jié)果。

5. 樣本的濃度可以直接從這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。濃度高于最高標(biāo)準(zhǔn)品的樣本必須進(jìn)一步稀釋或報(bào)告為> 20 mg/L。在計(jì)算濃度時(shí)，必須考慮這個(gè)稀釋因子。

結(jié)果的可靠性

測試必須嚴(yán)格按照制造商的使用說明進(jìn)行。此外，用戶必須嚴(yán)格遵守GLP（良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范）或其他適用的國家標(biāo)準(zhǔn)和/或法律。這對(duì)于使用對(duì)照試劑尤為重要。在測試程序中始終包含足夠數(shù)量的對(duì)照對(duì)于驗(yàn)證測試的準(zhǔn)確性和精確性是重要的。只有在所有對(duì)照都在指定范圍內(nèi)，且所有其他測試參數(shù)也在給定的測試規(guī)格內(nèi)時(shí)，測試結(jié)果才有效。如有任何疑問或擔(dān)憂，請(qǐng)聯(lián)系A(chǔ)LPCO。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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