ALPCO ACTH EIA IVD使用在內分泌疾病診斷中的重要性

ACTH（腎上腺皮質激素或促腎上腺皮質激素）是一種39個氨基酸的肽類激素（分子量=4500），由垂體分泌，用于調節腎上腺皮質產生類固醇激素。垂體前葉分泌的ACTH受到經典的負反饋控制機制和中樞神經系統（CNS）應激介導的控制系統的雙重調控。1 大腦中較高層次感知到的各種類型的壓力疼痛調節下丘腦神經分泌激素——促腎上腺皮質激素釋放激素（CRH）的分泌，CRH是一種41個氨基酸的肽。CRH刺激垂體ACTH的分泌。第二種調節ACTH分泌的肽是血管加壓素（AVP）。AVP的分泌也受到壓力的刺激，并與CRH協同作用，增加垂體門脈循環中的ACTH分泌。ACTH增加所有腎上腺類固醇的合成和釋放，包括醛固酮、皮質醇和腎上腺雄激素。它是人體最重要的糖皮質激素——皮質醇的主要調節因子。隨著血液中皮質醇水平的升高，垂體水平的ACTH釋放直接受到抑制。通過相同的機制，皮質醇水平的降低導致ACTH水平升高。2,3,4,5 生物活性ACTH是通過大前體分子——前阿片黑素皮質素（POMC）的酶解產生的。這個分子的結構中含有ACTH、前ACTH、β-黑色素細胞刺激激素、脂聯素以及內啡肽和腦啡肽的氨基酸序列。由于免疫分析中的反應是由抗原結構決定的，而不是生物功能，通常的ACTH放射免疫分析（RIA）會與POMC、前ACTH、ACTH以及ACTH的一些片段發生反應。5 與其他垂體激素一樣，ACTH以脈沖方式分泌。這些小脈沖疊加在特征性的晝夜波動上，波動幅度更大。在健康個體中，ACTH在清晨（06:00 - 08:00小時）達到峰值，而在一天晚些時候和睡眠期開始前水平最低。由于這種晝夜節律，通常在08:00至10:00小時之間抽取血漿ACTH樣本。然而，區分庫欣病患者和正常人可能最好在傍晚（16:00 - 18:00小時）獲得的樣本上實現。在庫欣病和異位ACTH綜合征中，ACTH分泌的晝夜模式通常不存在。壓力也可能覆蓋晝夜變化。ACTH ELISA用于定量測定人EDTA血漿中的促腎上腺皮質激素（ACTH）。本試驗適用于美國的體外診斷。本產品在美國以外地區“僅供研究使用”。

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ACTH EIA IVD使用檢測原理：

ACTH ELISA是一種雙位點酶聯免疫吸附測定法，用于測量ACTH的生物活性39個氨基酸鏈。通過親和層析純化的山羊人ACTH多克隆抗體和小鼠人ACTH單克隆抗體對ACTH分子上明確界定的區域具有特異性。制備一種抗體僅結合C末端ACTH 34-39，并且該抗體被生物素化。制備另一種抗體，僅結合中間區域和N端ACTH 1-24，該抗體用辣根過氧化物酶[HRP]標記進行檢測。

在該測定中，校準品、對照品或患者樣本在涂有鏈霉抗生物素蛋白的微孔板孔中與酶標記抗體和生物素偶聯抗體同時孵育。在測定孵育結束時，清洗微孔以去除未結合的成分，并將結合到固相上的酶與底物四甲基聯苯胺（TMB）一起孵育。然后加入酸性終止溶液以終止反應，并將顏色轉化為黃色。黃色的強度與樣品中ACTH的濃度成正比。使用校準器獲得的結果生成吸光度單位與濃度的劑量響應曲線。對照組和患者樣本中存在的ACTH濃度直接由該曲線確定。

樣品收集和儲存：

應在EDTA血漿樣品上進行ACTH測定。為了對樣品進行兩次分析，需要400?L的EDTA血漿。用薰衣草[EDTA]管收集全血。血漿應立即分離，最好放在冷凍離心機中，并儲存在-20℃或更低的溫度下。EDTA血漿樣品可在2-8°C下儲存8小時。在-20°C下冷凍的EDTA血漿樣本可穩定長達4個月。

文獻參考：

1. Ryan, WG: Endocrine Disorders – A Pathophysiologic Approach, 2nd Edition Year BookMedical Publishers, Inc. 1980.

2. Watts, N.B., J.H. Keffer: Practical Endocrine Diagnosis, Third Edition, Lea and Febioer, 1982.

3. Ganong, WF. Alpert LC, Lee TC: ACTH and the Regulation of Adrenocorticol Secretion, N.Engl. J. Med. 290: 1006, 1974.

4. Tepperman, J: Metabolic and Endocrine Physiology, 4th Edition, Year Book MedicalPublishers, Inc., 1981.

5. Odell, W.D., R. Horton, M.R. Pandian, J. Wong: The Use of ACTH and Cortisol Assays in theDiagnosis of Endocrine Disorders. Nichols Institute Publication, 1989.

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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