抗甲型肝炎ELISA是一種檢測甲型肝炎抗體的酶免疫測定法人血清中的病毒。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品抗HAV-ELISA定量。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

抗HAV-ELISA定量檢測原理：

Anti-HAV ELISA是一種偽競爭性酶免疫分析。血清或血漿樣本被加入到預先涂有滅活HAV抗原的微孔板孔中，并在37°C下孵育2小時。Anti-HAV抗體與抗原結合。然后添加結合物（過氧化物酶標記的Anti-HAV）并再次在37°C下孵育1小時。抗原的自由結合位點與結合物結合。多余的結合物從板上洗去，然后添加底物并在室溫下孵育30分鐘。結合的結合物將底物的顏色變?yōu)樗{色。通過添加終止液來終止反應。顏色變?yōu)辄S色。在微孔板讀取器上測量有色反應產物的吸光度。吸光度與Anti-HAV滴度成反比。對于定量測定，使用所包含的血清標準來準備滴定曲線。

定性測試分析：

為了在人類血清樣本中定性測定抗HAV抗體，產品開發(fā)過程中創(chuàng)建了一種方法，該方法能夠以98.3%的靈敏度（n=801）區(qū)分陽性和陰性樣本。為此，根據以下公式從陽性對照和陰性對照的信號計算出截止值：

截止值 = （陽性對照的平均吸光度 + 陰性對照的平均吸光度） / 2

平均吸光度值高于截止值的樣本為陰性。

吸光度值低于截止值的樣本為陽性。吸光度在截止值的±10%范圍內的樣本應重新測定。

表1顯示了一個示例測試結果。陰性和陽性對照之間的吸光度差異大于0.4（1.390至0.24）。計算截止值的結果如下：

截止值 = (NK + PK) / 2 = 1.390 + 0.024 = 0.707

因此，截止值是0.707。這樣，所有信號高于這個值的樣本被歸類為陰性（不含抗HAV抗體），所有信號低于0.707的樣本被評估為陽性（含有抗HAV抗體）。

血清樣本1的吸光度大于截止值，因此它是陰性的。血清樣本2的吸光度小于截止值，因此它是陽性的。在血清樣本3中，吸光度在0.778 - 0.636（±10%的0.707）的范圍內，必須如上例所示重復測定。

表1：以定性抗HAV測定結果為例

測試有效，因為符合以下條件：

陰性對照（NK）和陽性對照（PK）之間的消光差>0.4

文獻參考：

1) Flehmig, B.: Hepatitis A. Baillière`s Clinical Gastroenterology, Vol.4 No. 3, p. 707,1990.

2) Ambrosch, F. et al.: Comparison of HAV-Antibodies Induced by Vaccination,Passive Immunization, and Natural Infection. Viral Hepatitis and Liver Disease. S.98 (1990). (Editors: Hollinger, Lemon, Margolis, published by Williams and Wilkins, Baltimore; ISBN 0-683-04120-7).

3) Delem, A. et al.: Characterization of the immune response of volunteers vaccinated with a killed vaccine against hepatitis A. Vaccine, Vol. 11, Issue 4, S.479 (1993).

4) Heinricy, U. et al.: Schedule-dependent Immune Response to Hepatitis A Vaccination. Viral Hepatitis and Liver Disease. S. 108 (1990). (Editors: Hollinger,Lemon, Margolis, published by Williams and Wilkins, Baltimore; ISBN 0-683-04120-7).

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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