用于定量測(cè)定人血清中總甲狀腺素（T4）濃度。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品 總甲狀腺素ELISA（總T4 ELISA）。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

 總甲狀腺素ELISA（總T4 ELISA）檢測(cè)原理：

在T4酶免疫測(cè)定（EIA）中，微孔板孔上包被了一定量的抗T4抗體。將一定量的樣本和一定量的與辣根過氧化物酶結(jié)合的T4添加到微孔板孔中。在孵育過程中，T4和結(jié)合的T4競(jìng)爭(zhēng)抗T4抗體上的有限結(jié)合位點(diǎn)。在室溫下孵育60分鐘后，用水潤(rùn)洗孔5次以去除未結(jié)合的T4結(jié)合物。然后加入TMB試劑溶液并孵育20分鐘，導(dǎo)致藍(lán)色出現(xiàn)。通過加入停止溶液停止顏色發(fā)展，然后在450nm處用分光光度計(jì)測(cè)量吸光度。形成的色度強(qiáng)度與存在的酶量成正比，與樣本中未標(biāo)記T4的量成反比。通過參考以同樣方式測(cè)定的一系列T4標(biāo)準(zhǔn)品，可以定量未知樣本中T4的濃度。

測(cè)定程序

1. 將所需數(shù)量的包被孔固定在支架中。

2. 將25?L的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和對(duì)照品（未包含）移液至相應(yīng)的孔中。

3. 向每個(gè)孔中加入100 ?L的工作結(jié)合試劑。

4. 徹底混合30秒。完全混合非常重要。

5. 在室溫（18-25°C）下孵育60分鐘。

6. 將孵育混合物通過甩動(dòng)板子內(nèi)容物到廢物容器中移除。

7. 用蒸餾水沖洗微孔板5次，并甩動(dòng)。

8. 將孔猛擊在吸水紙或紙巾上，以去除所有殘留水滴。

9. 向每個(gè)孔中分發(fā)100?L的TMB試劑。輕輕混合10秒。

10. 在室溫下，避光孵育20分鐘。

11. 通過向每個(gè)孔中加入100?L的停止溶液來停止反應(yīng)。

12. 輕輕混合30秒。確保所有的藍(lán)色完全變?yōu)辄S色。

13. 在15分鐘內(nèi)使用微孔板讀取器讀取450nm的吸光度。

結(jié)果計(jì)算

1. 計(jì)算參考標(biāo)準(zhǔn)、對(duì)照品和樣本的重復(fù)組的平均吸光度值（OD450）。

2. 通過在對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制每個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)的平均吸光度與其濃度（?g/dL）的標(biāo)準(zhǔn)曲線，吸光度在垂直（y）軸上，濃度在水平（x）軸上。

3. 使用每個(gè)樣本的平均吸光度值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定相應(yīng)的T4濃度（?g/dL）。

標(biāo)準(zhǔn)曲線示例：

下面展示了一個(gè)典型的標(biāo)準(zhǔn)運(yùn)行結(jié)果，其中450納米處的光密度讀數(shù)顯示在Y軸上，而總T4濃度（?g/dL）顯示在X軸上。注意：標(biāo)準(zhǔn)曲線僅供說明之用，不應(yīng)用來計(jì)算未知值。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室必須為每次測(cè)定運(yùn)行提供自己的數(shù)據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)曲線。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長(zhǎng)。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。